Hep-56.1D

Hep-56.1D-hepatoomasolulinja on peräisin hiiren maksakasvaimesta, erityisesti C57BL/6J-hiirikannasta. Tälle solulinjalle on ominaista huomattava p53-geenin mutaatio, joka on tunnistettu eri vaiheissa in vitro -lisäyksen aikana. Erityisesti Hep-56.1D:ssä on C:G:stä G:C:ksi muuttunut transversio eksoni 5:n koodonissa 132, mikä johtaa aminohapon vaihtumiseen kysteiinistä tryptofaaniksi. Tämä mutaatio havaittiin läpiviennissä numero 17, mikä viittaa mutaation antamaan valikoivaan kasvuetuun, joka johtaa sen vallitsevuuteen solupopulaatiossa.

Hep-56.1D-solulinjalla on pääasiassa epiteelimorfologia, mikä kuvastaa sen hepatosyyttistä alkuperää. Tämä on yhdenmukaista sen intermediaaristen filamenttien proteiiniprofiilin kanssa, johon kuuluvat yksinkertaiset keratiinit K8 ja K18 sekä vaihtelevassa määrin vimentiini ja keratiini K19. Näiden proteiinien esiintyminen vahvistaa solulinjan hepatosyyttisen luonteen ja sen luokittelun hepatoomalinjaksi.

Hep-56.1D:n tarkempi analyysi DNA-sormenjäljen avulla ei paljastanut merkittäviä rakenteellisia poikkeavuuksia, vaikka tiettyjen kaistojen suhteellisessa intensiteetissä havaittiin joitakin muutoksia läpivirtauslukujen kasvaessa. Tämä viittaa genomiseen vakauteen, johon liittyy jonkinasteista vaihtelua pitkien viljelyjaksojen aikana. P53-mutaatioanalyysi ja välijuosteiden proteiinien ilmentymismallit yhdessä tekevät Hep-56.1D:stä arvokkaan mallin hepatosellulaarisen karsinooman ja p53-mutaatioiden roolin tutkimiseen maksan kasvainten synnyssä.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa