Hep-56.1D

تم اشتقاق سلالة خلايا الورم الكبدي Hep-56.1D من ورم كبدي لدى الفأر، وتحديداً من سلالة الفأر C57BL/6J. ويتميز هذا الخط الخلوي بطفرة ملحوظة في الجين p53، والتي تم تحديدها في ممرات مختلفة أثناء التكاثر في المختبر. على وجه التحديد، يُظهر Hep-56.1D تحولاً من C:G إلى G:C في الكودون 132 من الإكسون 5، مما يؤدي إلى تغيير الحمض الأميني من السيستين إلى التربتوفان. تم الكشف عن هذه الطفرة في الممر رقم 17، مما يشير إلى وجود ميزة نمو انتقائية تمنحها الطفرة، مما يؤدي إلى هيمنتها في مجموعة الخلايا.

يُظهر خط خلايا Hep-56.1D مورفولوجيا طلائية في الغالب، مما يعكس أصلها الكبدي. ويتسق هذا مع ملف بروتين الخيوط الوسيطة الذي يتضمن الكيراتين البسيط K8 و K18، بالإضافة إلى الفيميتين والكيراتين K19 بدرجات متفاوتة. يؤكد وجود هذه البروتينات الطبيعة الكبدية لخط الخلية وتصنيفه كخط ورم كبدي.

لم يكشف التحليل الإضافي ل Hep-56.1D باستخدام بصمات الحمض النووي عن أي تشوهات هيكلية كبيرة، على الرغم من ملاحظة بعض التغيرات في الكثافة النسبية لنطاقات محددة مع زيادة أعداد الممرات. يشير هذا إلى الاستقرار الجيني مع وجود درجة من التباين على مدى فترات الاستنبات الممتدة. يؤسس تحليل طفرة p53 وأنماط التعبير البروتيني للخيوط الوسيطة معًا Hep-56.1D كنموذج قيّم لدراسة سرطان الخلايا الكبدية ودور طفرات p53 في نشأة أورام الكبد.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان