Hep-56.1D

Hep-56.1D hepatomcellelinjen er avledet fra en leversvulst fra mus, nærmere bestemt fra musestammen C57BL/6J. Denne cellelinjen kjennetegnes av en bemerkelsesverdig mutasjon i p53-genet, som ble identifisert ved forskjellige passasjer under in vitro-oppformering. Hep-56.1D har en C:G til G:C-transversjon ved kodon 132 i ekson 5, noe som resulterer i en aminosyreendring fra cystein til tryptofan. Denne mutasjonen ble påvist ved passasjenummer 17, noe som tyder på at mutasjonen gir en selektiv vekstfordel og fører til at den dominerer i cellepopulasjonen.

Hep-56.1D-cellelinjen har en overveiende epitelial morfologi, noe som gjenspeiler dens hepatocytiske opprinnelse. Dette stemmer overens med proteinprofilen for intermediære filamenter, som inkluderer de enkle keratinene K8 og K18, samt vimentin og keratin K19 i varierende grad. Tilstedeværelsen av disse proteinene bekrefter cellelinjens hepatocytiske natur og klassifiseringen som en hepatomlinje.

Videre analyse av Hep-56.1D ved hjelp av DNA-fingeravtrykk avslørte ingen større strukturelle abnormiteter, selv om det ble observert noen endringer i den relative intensiteten av spesifikke bånd med økende passasjeantall. Dette indikerer genomisk stabilitet med en viss grad av variabilitet over lengre dyrkingsperioder. Analysen av p53-mutasjoner og ekspresjonsmønstrene for intermediære filamentproteiner gjør Hep-56.1D til en verdifull modell for studier av hepatocellulært karsinom og p53-mutasjoners rolle i tumorgenesen i leveren.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring