.jpg)
- Szövet
- Máj
- Betegség
- Hepatocelluláris karcinóma
- Szinonimák
- HEP-56.1D, 56.1D, 56.1d
Dokumentumok
Hep-56.1D
Cell line · Termékszám 400204
The Hep-56.1D hepatoma cell line is derived from a mouse liver tumor, specifically from the C57BL/6J mouse strain. This cell line is characterized by a no...
Személyre szabás / Ajánlások
- Hep-56.1DCell line€800.00
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
01Általános információk
- Leírás
A Hep-56.1D hepatóma sejtvonal egér májtumorból származik, kifejezetten a C57BL/6J egértörzsből. Ezt a sejtvonalat a p53 gén egy jelentős mutációja jellemzi, amelyet az in vitro szaporítás során különböző passzázsokban azonosítottak. Konkrétan a Hep-56.1D az 5. exon 132-es kodonjánál C:G-ről G:C-re történő transzverziót mutat, ami ciszteinről triptofánra történő aminosavváltozást eredményez. Ezt a mutációt a 17. passzázsszámnál észlelték, ami a mutáció által biztosított szelektív növekedési előnyre utal, ami a sejtpopulációban való túlsúlyához vezet.
A Hep-56.1D sejtvonal túlnyomórészt epiteliális morfológiát mutat, ami hepatocita eredetét tükrözi. Ez összhangban van az intermedier filamentum fehérjeprofiljával, amely tartalmazza az egyszerű keratinokat K8 és K18, valamint a vimentint és a keratin K19-et különböző mértékben. E fehérjék jelenléte megerősíti a sejtvonal hepatocita jellegét és hepatóma vonalnak való besorolását.
A Hep-56.1D további, DNS-ujjlenyomat-elemzéssel végzett elemzése nem mutatott ki jelentős szerkezeti rendellenességeket, bár az egyes sávok relatív intenzitásában a passzázsszám növekedésével bizonyos változásokat figyeltünk meg. Ez genomikai stabilitásra utal, bizonyos fokú változékonysággal a hosszabb tenyésztési időszakok alatt. A p53 mutációelemzés és az intermedier filament fehérje expressziós mintázatok együttesen a Hep-56.1D-t értékes modellként határozzák meg a hepatocelluláris karcinóma és a p53 mutációk májtumorigenezisben betöltött szerepének tanulmányozására.
- Szövet
- Máj
- Betegség
- Hepatocelluláris karcinóma
- Szinonimák
- HEP-56.1D
- 56.1D
- 56.1d
02Osztályozás
- Organizmus
- Egér
- Szex
- Nő
- Növekedési tulajdonságok
- Hűséges
- Biológiai biztonsági szint
- 1
03Jellemzők
- Morfológia
- Epithelszerű
- Daganatképző
- Igen, C57BL/6J egerekben. A harmadik héten kb. 5-6 mm átmérőjű tumorok alakulnak ki.
- Ploidiaállapot
- Aneuploid
- Kettőzési idő
- 25-30 óra
04Azonosítók
- Hivatkozás
- Hep-56.1D (Cytion katalógusszám 400204)
- NCBI adóazonosító szám
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_5769
05Kifejeződés és fogékonyság
- Fehérjeexpresszió
- Keratin 8, Keratin 18, Vimentin.
- Mutációs profil
- P53mut, C:G -+ G:C transzverzió az egér p53 5. exonjának 132-es kodonjánál, ami egy aminosavcserének felel meg, ciszteinről triptofánra.
06Kezelés és tenyésztés
- Táptalaj
- DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
- Inkubációs környezet
37°C, 5%CO2, párásított légkör.
- Kiegészítők
- A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
- Diszociációs reagens
- Accutase
- Átültetés
- Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
- Ültetési sűrűség
- 1–2 x 104 sejt/cm2 rutin tenyésztés során
- Folyadékcsere
- 3-4 naponta
- Az olvadás utáni helyreállás
- a sejtek >90%-a 24-48 órán belül visszanyerte a fagyasztásból származó sejteket
- Felolvasztás és tenyésztés
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás
- Meddőség
A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.
A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.
- Fagyasztóközeg
- Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
- Tárolási feltételek
Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.
- Szállítási feltételek
A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
08Adományozó
- Faj / alfaj
- C57BL/6J
- Az adományozó életkora
- Felnőtt
09Jogi és biztonsági információk
- Biztonsági óvintézkedések
- Ha egy kriovialitást folyékony nitrogénben tervezünk tárolni a későbbi kiolvasztás céljából, akkor kötelező betartani a szigorú biztonsági intézkedéseket. A megfelelő védőkesztyű és védőruházat elengedhetetlen, és a fagyasztott minták folyékony nitrogéntartályba vagy a folyékony nitrogéntartályból történő átvitele során arcmaszk vagy védőszemüveg használata szükséges. Ez azért van, hogy csökkentsék a kriovialis anyagok eltávolításakor bekövetkező esetleges robbanásból eredő sérülésveszélyt, amely éles szilánkok kilövellését eredményezheti.
- Jogi nyilatkozat
- Sejtjeinket kizárólag in vitro laboratóriumi kutatási célokra bocsátjuk rendelkezésre, és nem szánjuk klinikai vagy diagnosztikai felhasználásra, nem adhatóak be embereknek, és nem használhatók fel állatorvosi célokra. A felhasználóknak be kell tartaniuk a sejtek kutatási környezetben történő kezelésére és felhasználására vonatkozó valamennyi vonatkozó irányelvet és előírást.
- Garancia
A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak
A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban
- Anyagátadási megállapodás szükséges
- Igen