Hep-56.1D

Hep-56.1D肝細胞株はマウスの肝腫瘍、特にC57BL/6Jマウス系統に由来する。この細胞株は、in vitro増殖中の異なる継代で同定されたp53遺伝子の顕著な変異によって特徴づけられる。具体的には、Hep-56.1Dはエクソン5のコドン132でC:GからG:Cへの転座を示し、その結果アミノ酸がシステインからトリプトファンに変化している。この変異は継代番号17で検出され、この変異によって選択的に増殖が有利になり、細胞集団で優勢になったことを示唆している。

Hep-56.1D細胞株は、その肝細胞由来を反映して、主に上皮性の形態を示す。このことは、単純ケラチンK8とK18、そして程度の差はあるがビメンチンとケラチンK19を含む中間フィラメントタンパク質のプロフィールと一致している。これらのタンパク質の存在は、この細胞株の肝細胞性の性質と肝腫瘍株としての分類を裏付けるものである。

DNAフィンガープリンティングを用いたHep-56.1Dのさらなる解析では、継代数の増加に伴って特定のバンドの相対強度に若干の変化が観察されたものの、大きな構造異常は認められなかった。このことは、長期間の培養において、ある程度のばらつきはあるものの、ゲノムが安定していることを示している。p53変異の解析と中間フィラメントタンパク質の発現パターンを合わせると、Hep-56.1Dは肝細胞癌と肝腫瘍形成におけるp53変異の役割を研究するための貴重なモデルである。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。