Hep-56.1D

De hepatoomcellijn Hep-56.1D is afgeleid van een levertumor bij muizen, specifiek van de C57BL/6J muizenstam. Deze cellijn wordt gekarakteriseerd door een opmerkelijke mutatie in het p53-gen, geïdentificeerd op verschillende passages tijdens in vitro vermeerdering. Specifiek vertoont Hep-56.1D een C:G naar G:C transversie bij codon 132 van exon 5, wat resulteert in een aminozuurverandering van cysteïne naar tryptofaan. Deze mutatie werd ontdekt bij passagegetal 17, wat duidt op een selectief groeivoordeel van de mutatie, waardoor deze overheerst in de celpopulatie.

De Hep-56.1D cellijn vertoont een overwegend epitheliale morfologie, wat de hepatocytische oorsprong weerspiegelt. Dit komt overeen met het intermediaire filamenteiwitprofiel, dat de eenvoudige keratines K8 en K18 bevat, evenals vimentine en keratine K19 in verschillende mate. De aanwezigheid van deze eiwitten bevestigt de hepatocytische aard van de cellijn en de classificatie als hepatoomlijn.

Verdere analyse van Hep-56.1D met behulp van DNA-fingerprinting bracht geen belangrijke structurele afwijkingen aan het licht, hoewel er enkele veranderingen in de relatieve intensiteit van specifieke banden werden waargenomen bij toenemend aantal doorgangen. Dit duidt op genomische stabiliteit met een zekere mate van variabiliteit over langere kweekperioden. De p53-mutatieanalyse en expressiepatronen van intermediaire filamenteiwitten vormen samen een waardevol model voor het bestuderen van hepatocellulair carcinoom en de rol van p53-mutaties in levertumorigenese.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring