Hep-56.1D

Η κυτταρική σειρά ηπατώματος Hep-56.1D προέρχεται από όγκο του ήπατος ποντικού, συγκεκριμένα από το στέλεχος ποντικού C57BL/6J. Αυτή η κυτταρική σειρά χαρακτηρίζεται από μια αξιοσημείωτη μετάλλαξη στο γονίδιο p53, η οποία εντοπίστηκε σε διάφορα περάσματα κατά τον in vitro πολλαπλασιασμό. Συγκεκριμένα, το Hep-56.1D παρουσιάζει μεταστροφή από C:G σε G:C στο κωδικόνιο 132 του εξονίου 5, με αποτέλεσμα την αλλαγή αμινοξέος από κυστεΐνη σε τρυπτοφάνη. Η μετάλλαξη αυτή ανιχνεύθηκε στον αριθμό διέλευσης 17, γεγονός που υποδηλώνει ένα επιλεκτικό πλεονέκτημα ανάπτυξης που παρέχει η μετάλλαξη, οδηγώντας στην επικράτησή της στον κυτταρικό πληθυσμό.

Η κυτταρική σειρά Hep-56.1D εμφανίζει κατεξοχήν επιθηλιακή μορφολογία, γεγονός που αντανακλά την ηπατοκυτταρική της προέλευση. Αυτό συνάδει με το πρωτεϊνικό προφίλ των ενδιάμεσων νηματίων της, το οποίο περιλαμβάνει τις απλές κερατίνες Κ8 και Κ18, καθώς και βιμεντίνη και κερατίνη Κ19 σε διαφορετικό βαθμό. Η παρουσία αυτών των πρωτεϊνών επιβεβαιώνει την ηπατοκυτταρική φύση της κυτταρικής σειράς και την ταξινόμησή της ως ηπατώματος.

Η περαιτέρω ανάλυση της Hep-56.1D με τη χρήση δακτυλικών αποτυπωμάτων DNA δεν αποκάλυψε σημαντικές δομικές ανωμαλίες, αν και παρατηρήθηκαν ορισμένες αλλαγές στις σχετικές εντάσεις συγκεκριμένων ζωνών με την αύξηση του αριθμού διέλευσης. Αυτό υποδηλώνει γονιδιωματική σταθερότητα με κάποιο βαθμό μεταβλητότητας για παρατεταμένες περιόδους καλλιέργειας. Η ανάλυση των μεταλλάξεων του p53 και τα πρότυπα έκφρασης των πρωτεϊνών των ενδιάμεσων νηματίων μαζί καθιερώνουν το Hep-56.1D ως ένα πολύτιμο μοντέλο για τη μελέτη του ηπατοκυτταρικού καρκινώματος και του ρόλου των μεταλλάξεων του p53 στην καρκινογένεση του ήπατος.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης