M-07e

La lignée cellulaire M-07e est une sous-lignée dérivée de la lignée cellulaire leucémique humaine originale M-07, qui a été établie à partir du sang périphérique d'une fillette de 6 mois chez qui on a diagnostiqué une leucémie mégacaryoblastique aiguë (AML M7). Cette sous-ligne particulière a été isolée pour créer une lignée cellulaire dépendante de facteurs qui nécessite l'interleukine 3 (IL-3) ou le facteur de stimulation des colonies de granulocytes et de macrophages (GM-CSF) pour se développer, même en présence de sérum de veau fœtal. Les cellules M-07e présentent une prolifération robuste en réponse à une variété de cytokines, y compris le GM-CSF, les interférons (IFN-alpha, IFN-beta, IFN-gamma), IL-2, IL-3, IL-4, IL-6, IL-15, le facteur de croissance nerveuse (NGF), le facteur de cellules souches (SCF), le facteur de nécrose tumorale-alpha (TNF-alpha), et la thrombopoïétine (TPO). Cependant, leur dépendance à l'IL-3 ou au GM-CSF pour une croissance soutenue en fait un outil précieux dans les essais biologiques conçus pour mesurer l'activité biologique de ces cytokines spécifiques.

Les cellules M-07e sont notamment très sensibles à l'IL-3 et au GM-CSF, ce qui les rend idéales pour les essais où la détection de faibles niveaux de ces cytokines est cruciale. Par exemple, les tests biologiques utilisant les cellules M-07e peuvent détecter aussi peu que 25-50 pg/mL d'IL-3 ou de GM-CSF, ce qui les rend comparables ou même plus sensibles que les tests traditionnels tels que le CFU-GM ou les tests de prolifération des blastes de la LMC. Cependant, la lignée cellulaire a tendance à devenir indépendante des cytokines au bout de 3 à 4 semaines de culture, probablement en raison de la croissance de sous-populations indépendantes des cytokines, ce qui suggère qu'une surveillance attentive est nécessaire lors de l'utilisation de ces cellules pour des études à long terme. La disponibilité des données sur les séquences d'exome et d'ARN renforce encore l'utilité des cellules M-07e dans la recherche sur la leucémie et l'hématopoïèse.

Les cellules M-07e ont également été utilisées pour établir un test biologique quantitatif pour le GM-CSF et l'IL-3, ce qui est essentiel à la fois en clinique et en recherche. L'essai biologique développé avec cette lignée cellulaire s'est avéré pratique, fiable et sensible, ce qui le rend particulièrement utile pour évaluer les effets pharmacologiques des thérapies à base de facteurs de croissance hématopoïétiques. La réactivité détaillée des cellules M-07e à diverses cytokines, associée à leurs caractéristiques de croissance bien documentées, souligne leur valeur en hématologie expérimentale, en particulier dans les études liées à la leucémie et à l'application thérapeutique des cytokines.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie