M-07e

La línea celular M-07e es una sublínea derivada de la línea celular leucémica humana original M-07, la cual se estableció a partir de la sangre periférica de una niña de 6 meses de edad diagnosticada con leucemia megacarioblástica aguda (LMA M7). Esta sublínea en particular se aisló para crear una línea celular dependiente de factores que requiere interleucina-3 (IL-3) o factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos (GM-CSF) para crecer, incluso en presencia de suero fetal de ternera. Las células M-07e muestran una proliferación robusta en respuesta a una variedad de citocinas, entre ellas el GM-CSF, los interferones (IFN-alfa, IFN-beta, IFN-gamma), IL-2, IL-3, IL-4, IL-6, IL-15, el factor de crecimiento nervioso (NGF), el factor de células madre (SCF), el factor de necrosis tumoral alfa (TNF-alfa) y la trombopoyetina (TPO). Sin embargo, su dependencia de la IL-3 o del GM-CSF para un crecimiento sostenido las convierte en una herramienta valiosa en bioensayos diseñados para medir la actividad biológica de estas citocinas específicas.

Cabe destacar que las células M-07e son altamente sensibles a la IL-3 y al GM-CSF, lo que las hace ideales para su uso en ensayos en los que es crucial detectar niveles bajos de estas citocinas. Por ejemplo, los bioensayos que utilizan células M-07e pueden detectar cantidades tan pequeñas como 25-50 pg/mL de IL-3 o GM-CSF, lo que las hace comparables o incluso más sensibles que los ensayos tradicionales, como los de CFU-GM o los de proliferación de blastos en la leucemia mieloide crónica (LMC). Sin embargo, la línea celular tiende a volverse independiente de las citocinas al cabo de 3 a 4 semanas en cultivo, probablemente debido al crecimiento de subpoblaciones independientes de citocinas, lo que sugiere que es necesario un monitoreo cuidadoso al utilizar estas células para estudios a largo plazo. La disponibilidad de datos de secuenciación del exoma y del ARN mejora aún más la utilidad de las células M-07e en investigaciones centradas en la leucemia y la hematopoyesis.

Las células M-07e también se han empleado para establecer un bioensayo cuantitativo para el GM-CSF y la IL-3, lo cual es esencial tanto en entornos clínicos como de investigación. El bioensayo desarrollado con esta línea celular ha demostrado ser práctico, confiable y sensible, lo que lo hace particularmente útil para evaluar los efectos farmacológicos de las terapias con factores de crecimiento hematopoyéticos. La respuesta detallada de las células M-07e a diversas citocinas, combinada con sus características de crecimiento bien documentadas, subraya su valor en la hematología experimental, particularmente en estudios relacionados con la leucemia y la aplicación terapéutica de las citocinas.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.