M-07e

Celična linija M-07e je podlinija, pridobljena iz prvotne človeške levkemične celične linije M-07, ki je bila pridobljena iz periferne krvi šestmesečne deklice z diagnozo akutne megakarioblastne levkemije (AML M7). Ta posebna podlinija je bila izolirana z namenom ustvariti celično linijo, ki je odvisna od dejavnikov in za svojo rast potrebuje interlevkin-3 (IL-3) ali dejavnik, ki stimulira kolonije granulocitnih makrofagov (GM-CSF), tudi v prisotnosti fetalnega telečjega seruma. Celice M-07e kažejo močno proliferacijo kot odziv na različne citokine, vključno z GM-CSF, interferoni (IFN-alfa, IFN-beta, IFN-gama), IL-2, IL-3, IL-4, IL-6, IL-15, živčnim rastnim faktorjem (NGF), faktorjem matičnih celic (SCF), tumor nekroznim faktorjem alfa (TNF-alfa) in trombopoetinom (TPO). Vendar so zaradi odvisnosti od IL-3 ali GM-CSF za trajno rast dragoceno orodje v bioloških preskusih, namenjenih merjenju biološke aktivnosti teh specifičnih citokinov.

Celice M-07e so zelo občutljive na IL-3 in GM-CSF, zato so idealne za uporabo v testih, kjer je ključno zaznavanje nizkih ravni teh citokinov. Na primer, biološki testi z uporabo celic M-07e lahko zaznajo le 25-50 pg/ml IL-3 ali GM-CSF, zaradi česar so primerljivi ali celo bolj občutljivi kot tradicionalni testi, kot so CFU-GM ali testi proliferacije blastov CML. Vendar je celična linija nagnjena k temu, da v 3-4 tednih v kulturi postane neodvisna od citokinov, verjetno zaradi rasti subpopulacij, neodvisnih od citokinov, kar kaže, da je pri uporabi teh celic za dolgoročne študije potrebno skrbno spremljanje. Razpoložljivost podatkov o zaporedju eksomov in RNK še povečuje uporabnost celic M-07e v raziskavah, usmerjenih v levkemijo in krvotvorbo.

Celice M-07e so bile uporabljene tudi za vzpostavitev kvantitativnega biološkega testa za GM-CSF in IL-3, kar je bistvenega pomena tako v kliničnem kot raziskovalnem okolju. Biološki preskus, razvit s to celično linijo, se je izkazal za priročnega, zanesljivega in občutljivega, zato je še posebej uporaben za ocenjevanje farmakoloških učinkov terapij s hematopoetskimi rastnimi faktorji. Podrobna odzivnost celic M-07e na različne citokine skupaj z njihovimi dobro dokumentiranimi značilnostmi rasti poudarja njihovo vrednost v eksperimentalni hematologiji, zlasti v študijah, povezanih z levkemijo in terapevtsko uporabo citokinov.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo