M-07e

La linea cellulare M-07e è una sottolinea derivata dalla linea cellulare leucemica umana originale M-07, ottenuta dal sangue periferico di una bambina di 6 mesi con diagnosi di leucemia megacarioblastica acuta (AML M7). Questa particolare sottoclasse è stata isolata per creare una linea cellulare fattore-dipendente che richiede l'interleuchina-3 (IL-3) o il fattore di stimolazione delle colonie di macrofagi granulociti (GM-CSF) per la crescita, anche in presenza di siero fetale di vitello. Le cellule M-07e mostrano una robusta proliferazione in risposta a diverse citochine, tra cui GM-CSF, interferoni (IFN-alfa, IFN-beta, IFN-gamma), IL-2, IL-3, IL-4, IL-6, IL-15, fattore di crescita nervosa (NGF), fattore delle cellule staminali (SCF), fattore di necrosi tumorale alfa (TNF-alfa) e trombopoietina (TPO). Tuttavia, la loro dipendenza dall'IL-3 o dal GM-CSF per una crescita sostenuta le rende uno strumento prezioso nei biodosaggi volti a misurare l'attività biologica di queste specifiche citochine.

In particolare, le cellule M-07e sono altamente sensibili all'IL-3 e al GM-CSF, il che le rende ideali per l'uso in saggi in cui è fondamentale rilevare bassi livelli di queste citochine. Ad esempio, i biotest che utilizzano le cellule M-07e possono rilevare appena 25-50 pg/mL di IL-3 o GM-CSF, rendendoli paragonabili o addirittura più sensibili dei test tradizionali, come i test di proliferazione CFU-GM o CML blast. Tuttavia, la linea cellulare tende a diventare citochina-indipendente entro 3-4 settimane di coltura, probabilmente a causa della crescita di sottopopolazioni citochina-indipendenti, il che suggerisce che è necessario un attento monitoraggio quando si utilizzano queste cellule per studi a lungo termine. La disponibilità di dati di sequenza dell'esoma e dell'RNA aumenta ulteriormente l'utilità delle cellule M-07e nella ricerca sulla leucemia e sull'emopoiesi.

Le cellule M-07e sono state utilizzate anche per stabilire un biotest quantitativo per GM-CSF e IL-3, essenziale sia in ambito clinico che di ricerca. Il biotest sviluppato con questa linea cellulare si è dimostrato conveniente, affidabile e sensibile, rendendolo particolarmente utile per valutare gli effetti farmacologici delle terapie con fattori di crescita ematopoietici. La dettagliata reattività delle cellule M-07e a varie citochine, unita alle loro caratteristiche di crescita ben documentate, sottolinea il loro valore in ematologia sperimentale, in particolare negli studi relativi alla leucemia e all'applicazione terapeutica delle citochine.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia