M-07e

M-07e šūnu līnija ir apakšlīnija, kas atvasināta no oriģinālās cilvēka leikēmisko šūnu līnijas M-07, kura tika izveidota no 6 mēnešus vecas meitenes, kurai diagnosticēta akūta megakarioblastiskā leikēmija (AML M7), perifērajām asinīm. Šī konkrētā apakšlīnija tika izolēta, lai izveidotu no faktoriem atkarīgu šūnu līniju, kuras augšanai nepieciešams interleikīns-3 (IL-3) vai granulocītu makrofāgu koloniju stimulējošais faktors (GM-CSF), pat ja tiek lietots augļa teļa serums. M-07e šūnas uzrāda spēcīgu proliferāciju, reaģējot uz dažādiem citokīniem, tostarp GM-CSF, interferoniem (IFN-alfa, IFN-beta, IFN-gamma), IL-2, IL-3, IL-4, IL-6, IL-15, nervu augšanas faktoru (NGF), cilmes šūnu faktoru (SCF), audzēja nekrozes faktoru alfa (TNF-alfa) un trombopoetīnu (TPO). Tomēr to atkarība no IL-3 vai GM-CSF, lai nodrošinātu ilgstošu augšanu, padara tos par vērtīgu līdzekli bioloģiskajos testos, kas paredzēti šo specifisko citokīnu bioloģiskās aktivitātes mērīšanai.

M-07e šūnas ir ļoti jutīgas pret IL-3 un GM-CSF, tāpēc tās ir ideāli piemērotas izmantošanai analīzēs, kurās ir svarīgi noteikt zemu šo citokīnu līmeni. Piemēram, biotestos, kuros izmanto M-07e šūnas, var noteikt tikai 25-50 pg/ml IL-3 vai GM-CSF, tādējādi tie ir salīdzināmi vai pat jutīgāki nekā tradicionālie testi, piemēram, CFU-GM vai CML blast proliferācijas testi. Tomēr šūnu līnijai ir tendence kļūt no citokīniem neatkarīgai 3-4 nedēļu laikā kultūrā, iespējams, no citokīniem neatkarīgu subpopulāciju izaugšanas dēļ, kas liecina, ka, izmantojot šīs šūnas ilgtermiņa pētījumos, ir nepieciešama rūpīga uzraudzība. Eksoma un RNS sekvences datu pieejamība vēl vairāk palielina M-07e šūnu lietderību leikēmijas un hematopoēzes pētījumos.

M-07e šūnas ir izmantotas arī, lai noteiktu GM-CSF un IL-3 kvantitatīvu bioloģisko testu, kas ir būtiski gan klīniskajā, gan pētniecības jomā. Ar šo šūnu līniju izstrādātā bioloģiskā pārbaude ir izrādījusies ērta, uzticama un jutīga, tāpēc tā ir īpaši noderīga, lai novērtētu hematopoētisko augšanas faktoru terapijas farmakoloģisko iedarbību. Detalizētā M-07e šūnu reakcija uz dažādiem citokīniem apvienojumā ar to labi dokumentētajām augšanas īpašībām uzsver to vērtību eksperimentālajā hematoloģijā, jo īpaši pētījumos, kas saistīti ar leikēmiju un citokīnu terapeitisko izmantošanu.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu