M-07e

Bunková línia M-07e je sublínia odvodená od pôvodnej ľudskej leukemickej bunkovej línie M-07, ktorá bola vytvorená z periférnej krvi 6-mesačného dievčatka s diagnózou akútnej megakaryoblastickej leukémie (AML M7). Táto konkrétna sublínia bola izolovaná s cieľom vytvoriť bunkovú líniu závislú od faktorov, ktorá na svoj rast vyžaduje interleukín-3 (IL-3) alebo faktor stimulujúci kolónie granulocytových makrofágov (GM-CSF), a to aj v prítomnosti fetálneho teľacieho séra. Bunky M-07e vykazujú silnú proliferáciu v reakcii na rôzne cytokíny vrátane GM-CSF, interferónov (IFN-alfa, IFN-beta, IFN-gama), IL-2, IL-3, IL-4, IL-6, IL-15, nervového rastového faktora (NGF), faktora kmeňových buniek (SCF), tumor nekrotizujúceho faktora alfa (TNF-alfa) a trombopoetínu (TPO). Ich závislosť od IL-3 alebo GM-CSF pre trvalý rast z nich však robí cenný nástroj v biologických testoch určených na meranie biologickej aktivity týchto špecifických cytokínov.

Bunky M-07e sú vysoko citlivé na IL-3 a GM-CSF, čo ich robí ideálnymi na použitie v testoch, kde je rozhodujúce zisťovanie nízkych hladín týchto cytokínov. Napríklad biologické testy využívajúce bunky M-07e môžu detegovať len 25-50 pg/ml IL-3 alebo GM-CSF, čím sú porovnateľné alebo dokonca citlivejšie ako tradičné testy, ako sú testy CFU-GM alebo testy proliferácie CML blastov. Bunková línia má však tendenciu stať sa v priebehu 3 - 4 týždňov v kultúre nezávislou od cytokínov, pravdepodobne v dôsledku prerastania subpopulácií nezávislých od cytokínov, čo naznačuje, že pri používaní týchto buniek na dlhodobé štúdie je potrebné starostlivé monitorovanie. Dostupnosť údajov o exóme a sekvencii RNA ďalej zvyšuje využiteľnosť buniek M-07e vo výskume zameranom na leukémiu a krvotvorbu.

Bunky M-07e sa tiež použili na vytvorenie kvantitatívneho biologického testu GM-CSF a IL-3, ktorý je nevyhnutný v klinických aj výskumných podmienkach. Biologický test vyvinutý s touto bunkovou líniou sa ukázal ako vhodný, spoľahlivý a citlivý, vďaka čomu je obzvlášť užitočný na hodnotenie farmakologických účinkov terapií hematopoetickými rastovými faktormi. Podrobná reakcia buniek M-07e na rôzne cytokíny spolu s ich dobre zdokumentovanými rastovými vlastnosťami zdôrazňuje ich hodnotu v experimentálnej hematológii, najmä v štúdiách týkajúcich sa leukémie a terapeutického použitia cytokínov.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke