M-07e

M-07e rakuliin on alamliin, mis on saadud algsest M-07 inimese leukeemiarakuliinist, mis loodi 6 kuu vanuse tüdruku perifeersest verest, kellel oli diagnoositud äge megakarüoblastiline leukeemia (AML M7). See konkreetne alamliin isoleeriti, et luua faktorist sõltuv rakuliin, mis vajab kasvuks interleukiin-3 (IL-3) või granulotsüütide makrofaagikolooniaid stimuleerivat faktorit (GM-CSF) isegi loote vasikaseerumi juuresolekul. M-07e rakud näitavad tugevat proliferatsiooni vastusena erinevatele tsütokiinidele, sealhulgas GM-CSF, interferoonid (IFN-alfa, IFN-beeta, IFN-gamma), IL-2, IL-3, IL-4, IL-6, IL-15, närvi kasvufaktor (NGF), tüvirakufaktor (SCF), tuumornekroosifaktor-alfa (TNF-alfa) ja trombopoietiin (TPO). Nende sõltuvus IL-3-st või GM-CSF-st muudab nad siiski väärtuslikuks vahendiks biotestides, mis on kavandatud nende konkreetsete tsütokiinide bioloogilise aktiivsuse mõõtmiseks.

Eelkõige on M-07e rakud väga tundlikud IL-3 ja GM-CSF suhtes, mistõttu on nad ideaalsed katsetes, kus nende tsütokiinide madalate tasemete tuvastamine on oluline. Näiteks võivad M-07e rakke kasutavad biotestid tuvastada vaid 25-50 pg/ml IL-3 või GM-CSF-i, mis teeb need võrreldavaks või isegi tundlikumaks kui traditsioonilised testid, nagu CFU-GM või CML blastide proliferatsiooni testid. Siiski on rakuliinil kalduvus muutuda tsütokiinist sõltumatuks 3-4 nädala jooksul kultuuris, mis on tõenäoliselt tingitud tsütokiinist sõltumatute alampopulatsioonide väljakasvamisest, mis viitab sellele, et nende rakkude kasutamisel pikaajalistes uuringutes on vajalik hoolikas jälgimine. Eksoomi ja RNA järjestuse andmete kättesaadavus suurendab veelgi M-07e rakkude kasulikkust leukeemia ja hematopoeesia uurimisel.

M-07e rakke on kasutatud ka GM-CSF-i ja IL-3 kvantitatiivse biotesti tegemiseks, mis on oluline nii kliinilises kui ka teaduslikus kontekstis. Selle rakuliiniga välja töötatud biotest on osutunud mugavaks, usaldusväärseks ja tundlikuks, mistõttu on see eriti kasulik vereloome kasvufaktorite farmakoloogilise toime hindamiseks. M-07e rakkude üksikasjalik reageerimine erinevatele tsütokiinidele koos nende hästi dokumenteeritud kasvuomadustega rõhutab nende väärtust eksperimentaalses hematoloogias, eriti leukeemia ja tsütokiinide terapeutilise rakendamisega seotud uuringutes.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest