M-07e

Garis sel M-07e adalah subgaris yang berasal dari garis sel leukemia manusia M-07 yang asli, yang dibuat dari darah tepi seorang anak perempuan berusia 6 bulan yang didiagnosis dengan leukemia megakarioblastik akut (AML M7). Subgalur khusus ini diisolasi untuk menciptakan garis sel yang bergantung pada faktor yang membutuhkan interleukin-3 (IL-3) atau faktor perangsang koloni makrofag granulosit (GM-CSF) untuk pertumbuhannya, bahkan dengan adanya serum anak sapi janin. Sel M-07e menunjukkan proliferasi yang kuat sebagai respons terhadap berbagai sitokin, termasuk GM-CSF, interferon (IFN-alfa, IFN-beta, IFN-gamma), IL-2, IL-3, IL-4, IL-6, IL-15, faktor pertumbuhan saraf (NGF), faktor sel punca (SCF), faktor nekrosis tumor-alfa (TNF-alfa), dan trombopoietin (TPO). Namun, ketergantungan mereka pada IL-3 atau GM-CSF untuk pertumbuhan yang berkelanjutan membuat mereka menjadi alat yang berharga dalam bioassay yang dirancang untuk mengukur aktivitas biologis sitokin spesifik ini.

Khususnya, sel M-07e sangat sensitif terhadap IL-3 dan GM-CSF, menjadikannya ideal untuk digunakan dalam pengujian di mana mendeteksi tingkat sitokin yang rendah sangat penting. Misalnya, bioassay yang menggunakan sel M-07e dapat mendeteksi sedikitnya 25-50 pg / mL IL-3 atau GM-CSF, membuatnya sebanding dengan atau bahkan lebih sensitif daripada tes tradisional seperti tes proliferasi ledakan CFU-GM atau CML. Namun, garis sel memiliki kecenderungan untuk menjadi tidak bergantung pada sitokin dalam waktu 3-4 minggu dalam kultur, kemungkinan karena perkembangan subpopulasi yang tidak bergantung pada sitokin, yang menunjukkan bahwa pemantauan yang cermat diperlukan ketika menggunakan sel-sel ini untuk studi jangka panjang. Ketersediaan data sekuens eksom dan RNA semakin meningkatkan kegunaan sel M-07e dalam penelitian yang berfokus pada leukemia dan hematopoiesis.

Sel M-07e juga telah digunakan untuk membuat bioassay kuantitatif untuk GM-CSF dan IL-3, yang sangat penting dalam pengaturan klinis dan penelitian. Bioassay yang dikembangkan dengan garis sel ini telah terbukti nyaman, andal, dan sensitif, sehingga sangat berguna untuk menilai efek farmakologis terapi faktor pertumbuhan hematopoietik. Responsifitas sel M-07e yang terperinci terhadap berbagai sitokin, dikombinasikan dengan karakteristik pertumbuhannya yang terdokumentasi dengan baik, menggarisbawahi nilainya dalam hematologi eksperimental, terutama dalam penelitian yang berkaitan dengan leukemia dan aplikasi terapeutik sitokin.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami