M-07e

M-07e-cellelinjen er en sublinje avledet fra den opprinnelige humane leukemicellelinjen M-07, som ble etablert fra perifert blod fra en 6 måneder gammel jente som ble diagnostisert med akutt megakaryoblastisk leukemi (AML M7). Denne spesielle sublinjen ble isolert for å skape en faktoravhengig cellelinje som krever interleukin-3 (IL-3) eller granulocyttmakrofag kolonistimulerende faktor (GM-CSF) for å vokse, selv i nærvær av kalvefosterserum. M-07e-celler viser robust proliferasjon som respons på en rekke cytokiner, inkludert GM-CSF, interferoner (IFN-alfa, IFN-beta, IFN-gamma), IL-2, IL-3, IL-4, IL-6, IL-15, nervevekstfaktor (NGF), stamcellefaktor (SCF), tumornekrosefaktor-alfa (TNF-alfa) og trombopoietin (TPO). Men fordi de er avhengige av IL-3 eller GM-CSF for å opprettholde veksten, er de et verdifullt verktøy i bioassays som er utviklet for å måle den biologiske aktiviteten til disse spesifikke cytokinene.

M-07e-celler er svært følsomme for IL-3 og GM-CSF, noe som gjør dem ideelle til bruk i analyser der det er avgjørende å påvise lave nivåer av disse cytokinene. For eksempel kan bioanalyser med M-07e-celler påvise så lite som 25-50 pg/ml IL-3 eller GM-CSF, noe som gjør dem sammenlignbare med eller til og med mer følsomme enn tradisjonelle analyser som CFU-GM- eller CML-blastproliferasjonsanalyser. Cellelinjen har imidlertid en tendens til å bli cytokinuavhengig i løpet av 3-4 ukers dyrking, noe som sannsynligvis skyldes vekst av cytokinuavhengige subpopulasjoner, noe som tyder på at det er nødvendig med nøye overvåking når disse cellene brukes til langtidsstudier. Tilgangen på eksom- og RNA-sekvensdata gjør M-07e-cellene enda mer anvendelige i forskning på leukemi og hematopoese.

M-07e-celler har også blitt brukt til å etablere et kvantitativt bioassay for GM-CSF og IL-3, noe som er viktig i både kliniske og forskningsmessige sammenhenger. Bioassayet som er utviklet med denne cellelinjen, har vist seg å være praktisk, pålitelig og sensitivt, noe som gjør det spesielt nyttig for å vurdere de farmakologiske effektene av behandling med hematopoietiske vekstfaktorer. M-07e-cellenes respons på ulike cytokiner, kombinert med deres veldokumenterte vekstegenskaper, understreker deres verdi i eksperimentell hematologi, spesielt i studier knyttet til leukemi og terapeutisk bruk av cytokiner.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring