الانتقال إلى المحتوى
M-07e
الأنسجة
الدم المحيطي
المرض
ابيضاض الدم النخاعي الأرومي النخاعي الحاد في الطفولة
المرادفات
M-07E, M-O7e, M07-e, M07e, Mo7e, MO7e, M07E, MO7E

المستندات

M-07e

Cell line · رقم المنتج 305105

The M-07e cell line is a subline derived from the original M-07 human leukemic cell line, which was established from the peripheral blood of a 6-month-old...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

إن خط الخلايا M-07e هو سلالة فرعية مشتقة من خط الخلايا الأصلية لسرطان الدم البشري M-07، والذي تم إنشاؤه من الدم المحيطي لطفلة تبلغ من العمر 6 أشهر تم تشخيصها بسرطان الدم الحاد في النخاع الشوكي (AML M7). تم عزل هذا الخط الفرعي الخاص لإنشاء خط خلوي يعتمد على العامل الذي يتطلب عامل انترلوكين-3 (IL-3) أو عامل تحفيز مستعمرة الخلايا البلعمية المحببة (GM-CSF) للنمو، حتى في وجود مصل العجل الجنيني. تُظهر خلايا M-07e تكاثرًا قويًا استجابةً لمجموعة متنوعة من السيتوكينات، بما في ذلك العامل المحفز لاستعمار الخلايا البلعمية الحبيبية (GM-CSF) والإنترفيرون (IFN-alpha وIFN-beta وIFN-gamma) و IL-2 و IL-3 و IL-4 و IL-6 و IL-15 وعامل نمو الأعصاب (NGF) وعامل الخلايا الجذعية (SCF) وعامل نخر الورم ألفا (TNF-alpha) وعامل نخر الورم ألفا (TNF-alpha) وعامل الثرومبوبويتين (TPO). ومع ذلك، فإن اعتمادها على IL-3 أو GM-CSF للنمو المستدام يجعلها أداة قيمة في الاختبارات الحيوية المصممة لقياس النشاط البيولوجي لهذه السيتوكينات المحددة.

والجدير بالذكر أن خلايا M-07e حساسة للغاية ل IL-3 و GM-CSF، مما يجعلها مثالية للاستخدام في الفحوصات التي يكون فيها الكشف عن مستويات منخفضة من هذه السيتوكينات أمرًا بالغ الأهمية. على سبيل المثال، يمكن للمقايسات الحيوية التي تستخدم خلايا M-07e اكتشاف ما لا يقل عن 25-50 بيكوغرام/ملل من IL-3 أو GM-CSF، مما يجعلها مماثلة أو حتى أكثر حساسية من المقايسات التقليدية مثل مقايسات تكاثر الخلايا الكيسية-جيم أو مقايسات تكاثر الخلايا النخاعية. ومع ذلك، يميل خط الخلية إلى أن يصبح مستقلاً عن السيتوكين في غضون 3-4 أسابيع في المزرعة، ويرجع ذلك على الأرجح إلى نمو مجموعات سكانية فرعية مستقلة عن السيتوكين، مما يشير إلى ضرورة المراقبة الدقيقة عند استخدام هذه الخلايا للدراسات طويلة الأجل. إن توفر بيانات تسلسل الإكسوم والحمض النووي الريبي يعزز من فائدة خلايا M-07e في الأبحاث التي تركز على سرطان الدم وتكوين الدم.

كما تم استخدام خلايا M-07e لإنشاء اختبار حيوي كمي لسائل الغدد الصماء GM-CSF و IL-3، وهو أمر ضروري في كل من الإعدادات السريرية والبحثية. وقد أثبت الاختبار الحيوي الذي تم تطويره باستخدام هذا الخط الخلوي أنه ملائم وموثوق وحساس، مما يجعله مفيدًا بشكل خاص لتقييم الآثار الدوائية لعلاجات عوامل النمو المكونة للدم. وتؤكد الاستجابة التفصيلية لخلايا M-07e لمختلف السيتوكينات، إلى جانب خصائص نموها الموثقة جيداً، على قيمتها في علم أمراض الدم التجريبي، لا سيما في الدراسات المتعلقة بسرطان الدم والتطبيق العلاجي للسيتوكينات.

الأنسجة
الدم المحيطي
المرض
ابيضاض الدم النخاعي الأرومي النخاعي الحاد في الطفولة
المرادفات
  • M-07E
  • M-O7e
  • M07-e
  • M07e
  • Mo7e
  • MO7e
  • M07E
  • MO7E

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
التعليق
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الأرومة اللمفاوية
زمن المضاعفة
من 40 إلى 46 ساعة

04المعرّفات

المرجع
M-07e (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305105)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_2106

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط بالحمض الأميني المعطل بالحرارة بنسبة 15٪ FBS، وسائل الجينوم-سائل الجينوم المتسلسل (10 نانوغرام/مل)، وأضف 2.5 غم/لتر جلوكوز و10 ملي مولار هيبيس
إعادة الاستنبات
قم بتجانس معلق الخلايا في القارورة برفق عن طريق السحب لأعلى ولأسفل باستخدام ماصة، ثم خذ عينة تمثيلية لتحديد كثافة الخلايا لكل مل. قم بتخفيف المعلق للحصول على تركيز خلايا يبلغ 0.5 × 106 خلية/مل باستخدام وسط استزراع جديد، وقم بتقسيم المعلق المعدل إلى قوارير جديدة لمزيد من الاستزراع.
تجديد السوائل
كل يومين
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
6 أشهر
الأصل العرقي
أوروبي