MDA-MB-231-GFP

La lignée MDA-MB-231-GFP est une variante marquée par fluorescence de la lignée cellulaire MDA-MB-231, largement utilisée dans la recherche sur le cancer du sein humain, qui a été modifiée pour exprimer la protéine fluorescente verte (GFP) par transduction lentivirale. Cette modification permet la visualisation et la quantification en temps réel de la dynamique des cellules tumorales tant in vitro qu’in vivo, facilitant ainsi l’analyse détaillée des interactions entre la tumeur et le stroma, de la prolifération cellulaire et du comportement métastatique. La lignée parentale MDA-MB-231 provient d’un épanchement pleural d’une patiente atteinte d’un cancer du sein triple négatif (TNBC) et présente un comportement agressif et invasif associé à un phénotype mésenchymateux, ce qui en fait un modèle de référence pour l’étude de la physiopathologie du TNBC et de la résistance aux traitements.

Lors d’expériences de co-culture avec des cellules souches/stromales mésenchymateuses (CSM) humaines, les cellules MDA-MB-231-GFP ont montré une prolifération et un comportement favorisant la tumeur considérablement accrus. Des études ont montré que le contact direct avec les CSM, plutôt que les facteurs solubles seuls, est déterminant pour cet effet. Plus précisément, la co-culture avec des MSC a entraîné une augmentation de 39,5 % de la prolifération des cellules MDA-MB-231-GFP après quatre jours par rapport à la monoculture, et a induit l’expression du CD90 sur un sous-ensemble de cellules cancéreuses du sein — un marqueur qui n’est pas exprimé dans des conditions standard. Cette expression de CD90 induite par les CSM nécessitait une interaction cellule-cellule directe et était partiellement inhibée par le blocage des jonctions communicantes ou de la voie de signalisation Notch, ce qui indique l’implication de voies de communication intercellulaires spécifiques.

In vivo, la co-injection de cellules MDA-MB-231-GFP et de CSM chez des souris NOD/scid immunodéficientes a entraîné une multiplication par dix environ du volume tumoral et un potentiel métastatique accru par rapport à l’injection de cellules cancéreuses seules. Ces tumeurs présentaient une vascularisation accrue et une viabilité plus élevée, et conservaient une population minoritaire CD90-positive, ce qui corrobore les résultats obtenus in vitro. Dans l’ensemble, ces études positionnent la lignée MDA-MB-231-GFP comme un modèle robuste pour l’étude des interactions tumeur-stroma, de la plasticité phénotypique induite par les CSM et des mécanismes de progression tumorale dans le cancer du sein triple négatif.

Modification génétique : Modification stable obtenue par transduction lentivirale à réplication incompétente pour exprimer le rapporteur protéique fluorescent vert ZsGreen1 ; maintenue sous forme de population polyclonale sous sélection à la puromycine (1–5 µg/mL). Niveau de confinement S1/BSL-1.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie