MDA-MB-231-GFP

A MDA-MB-231-GFP é uma variante marcada com fluorescência da linha celular de cancro da mama humana MDA-MB-231, amplamente utilizada, que foi modificada para expressar a proteína fluorescente verde (GFP) através de transdução lentiviral. Esta modificação permite a visualização e quantificação em tempo real da dinâmica das células tumorais, tanto in vitro como in vivo, facilitando a análise detalhada das interações tumor-estroma, da proliferação celular e do comportamento metastático. A linha parental MDA-MB-231 tem origem num derrame pleural de uma doente com cancro da mama triplo-negativo (TNBC) e apresenta um comportamento agressivo e invasivo com um fenótipo mesenquimal, tornando-a um modelo fundamental para o estudo da fisiopatologia do TNBC e da resistência ao tratamento.

Em experiências de cocultura com células estaminais/estromais mesenquimais humanas (MSCs), as células MDA-MB-231-GFP demonstraram uma proliferação significativamente aumentada e um comportamento promotor de tumores. Estudos demonstraram que o contacto direto com as MSCs, e não apenas os fatores solúveis, é fundamental para este efeito. Mais especificamente, a cocultura com MSCs levou a um aumento de 39,5% na proliferação das células MDA-MB-231-GFP após quatro dias, em comparação com a monocultura, e induziu a expressão de CD90 num subconjunto de células de cancro da mama — um marcador que não é expresso em condições normais. Esta expressão de CD90 induzida pelas MSCs exigiu interação direta célula-célula e foi parcialmente inibida pelo bloqueio das junções comunicantes ou da via de sinalização Notch, indicando o envolvimento de vias específicas de comunicação intercelular.

In vivo, a co-injeção de células MDA-MB-231-GFP com MSCs em ratos NOD/scid imunodeficientes resultou num aumento de aproximadamente dez vezes no volume tumoral e num potencial metastático aumentado, em comparação com a injeção apenas de células cancerígenas. Estes tumores apresentaram vascularização elevada e maior viabilidade, e mantiveram uma população minoritária CD90-positiva, reforçando os resultados in vitro. Em conjunto, estes estudos posicionam as células MDA-MB-231-GFP como um modelo robusto para investigar as interações tumor-estroma, a plasticidade fenotípica induzida por MSCs e os mecanismos de progressão tumoral no cancro da mama triplo-negativo.

Modificação genética: Modificado de forma estável por transdução com lentivírus incapaz de se replicar para expressar o repórter da proteína fluorescente verde ZsGreen1; mantido como uma população policlonal sob seleção com puromicina (1–5 µg/mL). Nível de contenção S1/BSL-1.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia