MDA-MB-231-GFP

MDA-MB-231-GFP je fluorescenčne značená varianta široko používaného ľudského bunkového kmeňa rakoviny prsníka MDA-MB-231, ktorá bola geneticky upravená tak, aby prostredníctvom lentivírusovej transdukcie exprimovala zelený fluorescenčný proteín (GFP). Táto modifikácia umožňuje vizualizáciu a kvantifikáciu dynamiky nádorových buniek v reálnom čase tak in vitro, ako aj in vivo, čo uľahčuje podrobnú analýzu interakcií medzi nádorom a strómou, bunkovej proliferácie a metastatického správania. Pôvodná bunka MDA-MB-231 pochádza z pleurálneho výpotku pacientky s trojnásobne negatívnou rakovinou prsníka (TNBC) a vykazuje agresívne, invazívne správanie s mezenchýmovým fenotypom, čo z nej robí kľúčový model na štúdium patofyziológie TNBC a rezistencie voči liečbe.

V experimentoch s ko-kultúrou s ľudskými mezenchýmovými kmeňovými/stromálnymi bunkami (MSC) preukázali bunky MDA-MB-231-GFP výrazne zvýšenú proliferáciu a správanie podporujúce rast nádoru. Štúdie ukázali, že pre tento efekt je rozhodujúci priamy kontakt s MSC, a nie samotné rozpustné faktory. Konkrétne, spoločná kultivácia s MSC viedla po štyroch dňoch k 39,5 % nárastu proliferácie buniek MDA-MB-231-GFP v porovnaní s monokultúrou a indukovala expresiu CD90 na podskupine buniek rakoviny prsníka – markeru, ktorý sa za štandardných podmienok neexprimuje. Táto MSC-indukovaná expresia CD90 si vyžadovala priamu interakciu medzi bunkami a bola čiastočne inhibovaná blokovaním gap junctions alebo Notch signalizácie, čo naznačuje zapojenie špecifických medzibunkových komunikačných dráh.

In vivo viedla súbežná injekcia buniek MDA-MB-231-GFP spolu s MSC do imunodeficientných myší NOD/scid k približne desaťnásobnému zvýšeniu objemu nádoru a zvýšenému metastatickému potenciálu v porovnaní s injekciou samotných rakovinových buniek. Tieto nádory vykazovali zvýšenú vaskularizáciu a vyššiu životaschopnosť a zachovali si menšinovú populáciu CD90-pozitívnych buniek, čo potvrdzuje zistenia in vitro. V súhrne tieto štúdie zaradzujú MDA-MB-231-GFP medzi spoľahlivé modely na skúmanie interakcií medzi nádorom a strómou, fenotypovej plasticity indukovanej MSC a mechanizmov progresie nádoru pri trojito negatívnom karcinóme prsníka.

Genetická modifikácia: Stabilne modifikované replikačne nekompetentnou lentivírusovou transdukciou na expresiu reportérového zeleného fluorescenčného proteínu ZsGreen1; udržiavané ako polyklonálna populácia pri selekcii puromycínom (1–5 µg/ml). Úroveň bezpečnosti S1/BSL-1.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke