MDA-MB-231-GFP

MDA-MB-231-GFPは、広く使用されているヒト乳がん細胞株MDA-MB-231の蛍光標識変異株であり、レンチウイルスによる導入によって緑色蛍光タンパク質（GFP）を発現するように改変されています。 この改変により、in vitroおよびin vivoの両方において腫瘍細胞の動態をリアルタイムで可視化・定量化することが可能となり、腫瘍と間質との相互作用、細胞増殖、および転移挙動の詳細な解析が容易になります。 親株である MDA-MB-231 細胞株は、トリプルネガティブ乳がん（TNBC）患者の胸水に由来し、間葉系表現型を伴う侵襲性の高い挙動を示すため、TNBC の病態生理および治療抵抗性を研究するための基礎となるモデルとなっています。

ヒト間葉系幹細胞／間質細胞（MSC）との共培養実験において、MDA-MB-231-GFP細胞は増殖および腫瘍促進能が著しく増強されることが示された。研究により、この効果には可溶性因子のみではなく、MSCとの直接的な接触が不可欠であることが明らかになった。 具体的には、MSCとの共培養により、単培養と比較して4日後にMDA-MB-231-GFP細胞の増殖が39.5％増加し、標準条件下では発現しないマーカーであるCD90が、一部の乳がん細胞で誘導された。 このMSCによるCD90の発現誘導には、細胞間の直接的な相互作用が必要であり、ギャップ結合やNotchシグナル伝達を遮断することで部分的に抑制されたことから、特定の細胞間コミュニケーション経路が関与していることが示唆された。

生体内では、免疫不全NOD/scidマウスにMDA-MB-231-GFP細胞とMSCを同時に注入したところ、がん細胞のみを注入した場合と比較して、腫瘍体積が約10倍に増加し、転移能も増強された。 これらの腫瘍は、血管新生が亢進し、生存率も高く、少数の CD90 陽性細胞群を維持しており、in vitro での知見を裏付ける結果となった。 これらの研究結果から、MDA-MB-231-GFP は、腫瘍と間質の相互作用、MSC による表現型の可塑性、およびトリプルネガティブ乳がんの腫瘍進行メカニズムを調査するための堅牢なモデルであることが示されています。

遺伝子改変：複製不能なレンチウイルスによる導入により、ZsGreen1 緑色蛍光タンパク質レポーターを発現するように安定的に改変されています。プテロマイシン（1～5 µg/mL）による選別下で、ポリクローナル集団として維持されています。S1/BSL-1 封じ込めレベル。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。