MDA-MB-231-GFP

MDA-MB-231-GFP es una variante marcada con fluorescencia de la línea celular de cáncer de mama humano MDA-MB-231, ampliamente utilizada, que ha sido modificada genéticamente para expresar la proteína fluorescente verde (GFP) mediante transducción lentiviral. Esta modificación permite visualizar y cuantificar en tiempo real la dinámica de las células tumorales tanto in vitro como in vivo, lo que facilita el análisis detallado de las interacciones entre el tumor y el estroma, la proliferación celular y el comportamiento metastásico. La línea parental MDA-MB-231 procede de un derrame pleural de una paciente con cáncer de mama triple negativo (TNBC) y presenta un comportamiento agresivo e invasivo con un fenotipo mesenquimal, lo que la convierte en un modelo fundamental para el estudio de la fisiopatología del TNBC y la resistencia al tratamiento.

En experimentos de cocultivo con células madre/estromales mesenquimales (MSC) humanas, las células MDA-MB-231-GFP han demostrado una proliferación y un comportamiento promotor de tumores significativamente mayores. Los estudios han demostrado que el contacto directo con las MSC, más que los factores solubles por sí solos, es fundamental para este efecto. Concretamente, el cocultivo con MSC provocó un aumento del 39,5 % en la proliferación de las células MDA-MB-231-GFP al cabo de cuatro días en comparación con el monocultivo, e indujo la expresión de CD90 en un subconjunto de células de cáncer de mama —un marcador que no se expresa en condiciones estándar—. Esta expresión de CD90 inducida por las MSC requirió una interacción directa célula-célula y se inhibió parcialmente al bloquear las uniones comunicantes o la señalización Notch, lo que indica la participación de vías específicas de comunicación intercelular.

In vivo, la coinyección de células MDA-MB-231-GFP con MSC en ratones NOD/scid inmunodeficientes dio lugar a un aumento de aproximadamente diez veces en el volumen tumoral y a un mayor potencial metastásico en comparación con la inyección de células cancerosas por sí solas. Estos tumores presentaban una vascularización elevada y una mayor viabilidad, y conservaban una población minoritaria positiva para CD90, lo que refuerza los hallazgos in vitro. En conjunto, estos estudios sitúan a la línea celular MDA-MB-231-GFP como un modelo sólido para investigar las interacciones tumor-estroma, la plasticidad fenotípica inducida por las MSC y los mecanismos de progresión tumoral en el cáncer de mama triple negativo.

Modificación genética: Modificado de forma estable mediante transducción con un lentivirus incapaz de replicarse para expresar el reportero de proteína fluorescente verde ZsGreen1; se mantiene como una población policlonal bajo selección con puromicina (1–5 µg/mL). Contención S1/BSL-1.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía