MDA-MB-231-GFP

MDA-MB-231-GFP er en fluorescensmærket variant af den udbredte humane brystkræftcellelinje MDA-MB-231, der er genetisk modificeret til at udtrykke grønt fluorescerende protein (GFP) via lentiviral transduktion. Denne modifikation muliggør visualisering og kvantificering i realtid af tumorcellernes dynamik både in vitro og in vivo, hvilket letter en detaljeret analyse af interaktioner mellem tumor og stroma, cellulær proliferation og metastatisk adfærd. Den oprindelige MDA-MB-231-linje stammer fra en pleural effusion hos en patient med tredobbelt-negativ brystkræft (TNBC) og udviser aggressiv, invasiv adfærd med en mesenkymalt fænotype, hvilket gør den til en grundlæggende model for studiet af TNBC's patofysiologi og behandlingsresistens.

I samdyrkningsforsøg med humane mesenkymale stam-/stromaceller (MSC’er) har MDA-MB-231-GFP-celler vist en markant forøget proliferation og tumorfremmende adfærd. Undersøgelser har vist, at direkte kontakt med MSC’er – snarere end opløselige faktorer alene – er afgørende for denne effekt. Konkret førte samdyrkning med MSC’er til en stigning på 39,5 % i MDA-MB-231-GFP-cellernes proliferation efter fire dage sammenlignet med monokultur og inducerede ekspression af CD90 på en undergruppe af brystkræftceller – en markør, der ikke udtrykkes under standardbetingelser. Denne MSC-inducerede CD90-ekspression krævede direkte celle-til-celle-interaktion og blev delvist hæmmet ved blokering af gap-junctions eller Notch-signalering, hvilket indikerer involvering af specifikke intercellulære kommunikationsveje.

In vivo resulterede co-injektion af MDA-MB-231-GFP-celler sammen med MSC'er i immundefekte NOD/scid-mus i et ca. tidoblet tumorvolumen og forøget metastatisk potentiale sammenlignet med injektion af kræftceller alene. Disse tumorer udviste forøget vaskularisering og højere levedygtighed samt bevarede en mindre CD90-positiv population, hvilket underbygger in vitro-fundene. Samlet set positionerer disse studier MDA-MB-231-GFP som en robust model til undersøgelse af interaktioner mellem tumor og stroma, MSC-induceret fænotypisk plasticitet og mekanismer for tumorprogression i tredobbelt-negativ brystkræft.

Genetisk modifikation: Stabilt modificeret ved replikationsinkompetent lentiviral transduktion til at udtrykke ZsGreen1-reporteren for grønt fluorescerende protein; opretholdes som en polyklonal population under puromycin-selektion (1–5 µg/mL). S1/BSL-1-indeslutning.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring