MDA-MB-231-GFP

MDA-MB-231-GFP on laialdaselt kasutatava inimese rinnavähi rakuliini MDA-MB-231 fluorestsentsmärgistatud variant, mis on geneetiliselt muundatud nii, et see ekspresseerib rohelist fluorestsentsvalku (GFP) lentiviiruse transduktsiooni kaudu. See modifikatsioon võimaldab kasvajarakkude dünaamika reaalajas visualiseerimist ja kvantifitseerimist nii in vitro kui ka in vivo, hõlbustades kasvaja ja strooma vaheliste interaktsioonide, rakkude proliferatsiooni ja metastaatilise käitumise üksikasjalikku analüüsi. Algrakuliin MDA-MB-231 pärineb kolmekordselt negatiivse rinnavähiga (TNBC) patsiendi pleuraefusioonist ning näitab agressiivset, invasiivset käitumist koos mesenküümse fenotüübiga, mis teeb sellest nurgakivimudeli TNBC patofüsioloogia ja raviresistentsuse uurimiseks.

Ko-kultuuri katsetes inimese mesenküümse tüvi-/strooma-rakkudega (MSC-d) on MDA-MB-231-GFP-rakud näidanud märkimisväärselt suurenenud proliferatsiooni ja kasvajat soodustavat käitumist. Uuringud näitasid, et selle efekti saavutamiseks on otsustava tähtsusega otsene kontakt MSC-dega, mitte ainult lahustuvad faktorid. Täpsemalt põhjustas kooskasvatus MSC-dega nelja päeva möödudes MDA-MB-231-GFP-rakkude proliferatsiooni 39,5% kasvu võrreldes monokultuuriga ning indutseeris CD90 ekspressiooni osal rinnavähi rakkudest – see on marker, mida tavatingimustes ei ekspresseerita. See MSC-de poolt indutseeritud CD90 ekspressioon nõudis otsest rakkudevahelist interaktsiooni ning seda pärssis osaliselt gap-ühenduste või Notch-signaalimise blokeerimine, mis viitab spetsiifiliste rakkudevaheliste kommunikatsiooniteede kaasatusele.

In vivo tingis MDA-MB-231-GFP-rakkude ja mesenhümaalse tüvirakkude (MSC) ühine süstimine immuunpuudulikkusega NOD/scid-hiirtesse võrreldes ainult vähirakkude süstimisega ligikaudu kümnekordse kasvajamahtu suurenemise ja metastaaside tekkimise potentsiaali suurenemise. Nendel kasvajatel esines kõrgenenud vaskularisatsioon ja suurem eluvõime ning neis säilis väike CD90-positiivne populatsioon, mis kinnitas in vitro tulemusi. Kokkuvõttes paigutavad need uuringud MDA-MB-231-GFP tugeva mudelina kasvajastroma interaktsioonide, MSC-de poolt indutseeritud fenotüübilise plastilisuse ja kolmiknegatiivse rinnavähi kasvaja progresseerumise mehhanismide uurimiseks.

Geneetiline modifikatsioon: stabiilselt modifitseeritud replikatsioonivõimetu lentiviiruse transduktsiooni abil, et ekspresseerida rohelist fluorestsentsvalku ZsGreen1; säilitatakse polüklonaalse populatsioonina puromütsiini selektsiooni all (1–5 µg/mL). S1/BSL-1 ohutustase.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest