MDA-MB-231-GFP

MDA-MB-231-GFP er en fluorescerende merket variant av den mye brukte humane brystkreftcellelinjen MDA-MB-231, som er genmodifisert til å uttrykke grønt fluorescerende protein (GFP) gjennom lentiviral transduksjon. Denne modifikasjonen muliggjør visualisering og kvantifisering i sanntid av tumorcelledynamikken både in vitro og in vivo, noe som letter detaljert analyse av interaksjoner mellom tumor og stroma, celleproliferasjon og metastatisk atferd. Den opprinnelige MDA-MB-231-linjen stammer fra en pleural effusjon hos en pasient med trippel-negativ brystkreft (TNBC) og viser aggressiv, invasiv atferd med en mesenkymalt fenotype, noe som gjør den til en hjørnesteinsmodell for å studere TNBCs patofysiologi og behandlingsresistens.

I samdyrkningsforsøk med humane mesenkymale stam-/stromaceller (MSC-er) har MDA-MB-231-GFP-celler vist betydelig økt proliferasjon og tumorfremmende atferd. Studier har vist at direkte kontakt med MSC-er, snarere enn oppløselige faktorer alene, er avgjørende for denne effekten. Nærmere bestemt førte samdyrking med MSC-er til en økning på 39,5 % i MDA-MB-231-GFP-celleproliferasjonen etter fire dager sammenlignet med monokultur, og induserte uttrykk av CD90 på en undergruppe av brystkreftceller – en markør som ikke uttrykkes under standardbetingelser. Denne MSC-induserte CD90-ekspresjonen krevde direkte celle-til-celle-interaksjon og ble delvis hemmet ved å blokkere gap-junctions eller Notch-signalering, noe som indikerer involvering av spesifikke intercellulære kommunikasjonsveier.

In vivo resulterte samtidig injeksjon av MDA-MB-231-GFP-celler og MSC-er i immunsvake NOD/scid-mus i et omtrent tidoblet tumorvolum og økt metastasepotensial sammenlignet med injeksjon av kreftceller alene. Disse svulstene viste økt vaskularisering og høyere levedyktighet, og beholdt en minoritetsbefolkning av CD90-positive celler, noe som bekrefter in vitro-funnene. Samlet sett posisjonerer disse studiene MDA-MB-231-GFP som en robust modell for å undersøke interaksjoner mellom svulst og stroma, MSC-indusert fenotypisk plastisitet og mekanismer for svulstprogresjon ved trippel-negativ brystkreft.

Genetisk modifisering: Stabilt modifisert ved replikasjonsinkompetent lentiviral transduksjon for å uttrykke ZsGreen1-reporteren for grønt fluorescerende protein; opprettholdes som en polyklonal populasjon under puromycin-seleksjon (1–5 µg/mL). S1/BSL-1-inneslutning.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring