MDA-MB-231-GFP

MDA-MB-231-GFP je fluorescenčno označena različica široko uporabljane človeške celične linije raka dojke MDA-MB-231, ki je bila genetsko spremenjena tako, da prek lentiviralne transdukcije izraža zeleni fluorescenčni protein (GFP). Ta modifikacija omogoča vizualizacijo in kvantifikacijo dinamike tumorskih celic v realnem času tako in vitro kot in vivo, kar olajšuje podrobno analizo interakcij med tumorjem in stromo, celične proliferacije ter metastaziranja. Izvorna linija MDA-MB-231 izvira iz plevralnega izliva pacientke s trojno negativnim rakom dojke (TNBC) in kaže agresivno, invazivno vedenje z mezenhimalnim fenotipom, kar jo uvršča med temeljne modele za preučevanje patofiziologije TNBC in odpornosti na zdravljenje.

V poskusih s skupno kulturo s človeškimi mezenhimalnimi matičnimi/stromalnimi celicami (MSC) so celice MDA-MB-231-GFP pokazale znatno povečano proliferacijo in tumor spodbujajoče vedenje. Študije so pokazale, da je za ta učinek ključen neposreden stik z MSC, ne pa zgolj topni dejavniki. Natančneje, skupna kultura z MSC je po štirih dneh povzročila 39,5-odstotno povečanje proliferacije celic MDA-MB-231-GFP v primerjavi z monokulturo ter inducirala izražanje CD90 na podskupini celic raka dojke – markerja, ki se v standardnih pogojih ne izraža. Ta izražanje CD90, ki ga povzročajo MSC, je zahtevalo neposredno medcelično interakcijo in je bilo delno zavrto z blokiranjem gap junctionov ali Notch signalizacije, kar kaže na vpletenost specifičnih poti medcelične komunikacije.

In vivo je sočasna injekcija celic MDA-MB-231-GFP in MSC v imunodeficientne miši NOD/scid povzročila približno desetkratno povečanje volumna tumorja in povečan metastazni potencial v primerjavi z injekcijo samih rakavih celic. Ti tumorji so kazali povečano vaskularizacijo in višjo sposobnost preživetja ter ohranili manjšinsko populacijo, pozitivno na CD90, kar potrjuje ugotovitve iz in vitro raziskav. Skupaj te študije uvrščajo MDA-MB-231-GFP med zanesljive modele za preučevanje interakcij med tumorjem in stromo, fenotipsko plastičnost, ki jo inducirajo MSC, ter mehanizme napredovanja tumorja pri trojno negativnem raku dojke.

Genetska modifikacija: Stabilno modificirana z replikacijsko nesposobno lentiviralno transdukcijo za izražanje zelenega fluorescenčnega beljakovinskega reporterja ZsGreen1; ohranjena kot poliklonalna populacija pod selekcijo s puromicinom (1–5 µg/mL). Varnostna stopnja S1/BSL-1.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo