Tartalomra ugrás
BV2
Szövet
Agy
Szinonimák
BV-2

Dokumentumok

BV2

Cell line · Termékszám 305156

BV2 cells are a type of microglial cell line derived from C57BL/6 murine, a widely used laboratory mouse strain for animal experiments. These microglial c...

€650.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A BV2 sejtek a mikrogliasejtek egy típusa, amely a C57BL/6 egértörzsből, az állatkísérletekhez széles körben használt laboratóriumi egértörzsből származik. Ezeket a mikroglia sejteket a v-raf és v-myc onkogéneket hordozó J2 retrovírus segítségével immortalizálták, ami egy egyedi tulajdonságokkal rendelkező stabil sejtvonalat eredményezett. A BV2 sejtek nukleáris v-myc és citoplazmatikus v-RAF onkogéneket expresszálnak, valamint az env gp70 antigént a felszínükön, ami hozzájárul az immunválaszban és az agyban zajló gyulladásban betöltött szerepükhöz. A BV2 sejtek egyik kritikus előnye, hogy képesek megtartani a primer mikroglia, a központi idegrendszer rezidens immunsejtjeinek morfológiai és funkcionális jellemzőit, ami ideális modellé teszi őket a neurodegeneráció és az agyi gyulladás tanulmányozására.

A mikroglia szerepe a neurodegenerációban, a toxikológiában és az immunitásban, különösen az Alzheimer-kórhoz hasonló állapotokban, egyre növekvő terület az orvosbiológiai kutatásban. A hagyományos vizsgálatok gyakran támaszkodnak primer mikroglia-kultúrákra és folyamatos sejtkészítményekre. Egy mikroglia-szerű sejtvonal, például a BV2 sejtek használata ígéretes alternatívát kínál, mivel folyamatos és reprodukálható mikrogliaforrást biztosít. A BV2 sejtek a v-raf/v-myc expressziónak köszönhetően fokozott anyagcserét és növekedést mutatnak, ami ideális a mikroglia aktiváció és a gyulladás kutatásához. A specifikus onkogének és antigének expressziója a makrofágokét tükrözi, így értékesnek bizonyulnak az immunválaszok és a betegségmechanizmusok tanulmányozásához.

Az egerek BV2 mikroglia sejtjeinek nemrégiben végzett újraértékelése során vizsgálták, hogy alkalmasak-e a primer mikroglia (PM) helyettesítésére. A BV2 sejtek lipopoliszacharidra adott válaszát mind in vitro, mind in vivo körülmények között összehasonlították a mikrogliákéval, azonban a gének felszabályozása átlagosan kissé kevésbé volt kifejezett. A BV2 sejtek normális nitrogén-oxid szabályozást és az IFN-gammára adott funkcionális választ mutattak, amelyek kritikus paraméterek a T-sejtekkel, neuronokkal és más gliasejtekkel, például asztrocitákkal való kölcsönhatásuk szempontjából. A BV2 sejtek más gliasejteket is hatékonyan stimuláltak, ami az interleukin-6 (IL-6) termeléséhez vezetett az asztrocitákban.

Az asztrociták és mikroglia közötti ilyen kölcsönhatás kulcsfontosságú az agyban zajló összetett sejt-sejt kölcsönhatások és a gyulladásos válasz megértéséhez, különösen az Alzheimer-kórhoz hasonló neurodegeneratív betegségek összefüggésében, ahol az olyan fehérjék, mint a NAPoe31 és NAPoe41, valamint az olyan útvonalak, mint a startle-válasz és az apoptózis, jelentős szerepet játszanak.

A BV2 sejtek robusztus és megbízható eszközt kínálnak a mikroglia biológiájának kutatói számára. A v-raf/v-myc onkogén termékek expressziója lehetővé teszi számukra, hogy megtartsák a mikroglia és a makrofágok kulcsfontosságú jellemzőit. A BV2 sejtek különböző kísérleti beállításokban a primer mikroglia érvényes helyettesítőjének bizonyultak, megkönnyítve a neurodegeneráció, a toxikológia, az immunitás és a sejt-sejt kölcsönhatások kutatását.

Szövet
Agy
Szinonimák
  • BV-2

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Morfológia mikroglia

04Azonosítók

Hivatkozás
BV2 (Cytion katalógusszám: 305156)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_0182

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Gyűjtse össze a szuszpenziós sejteket egy 15 ml-es csőbe, és óvatosan mossa át a megtapadt sejteket kalciumot és magnéziumot nem tartalmazó PBS-szel (T25 lombik esetén 3-5 ml-t, T75 lombik esetén 5-10 ml-t használjon). Vigyen fel Accutase-t (1-2 ml-t T25 lombikokhoz, 2,5 ml-t T75 lombikokhoz), biztosítva a sejtréteg teljes lefedettségét. Hagyjuk a sejteket 10 percig szobahőmérsékleten inkubálni. Az inkubációt követően egyesítsük és centrifugáljuk a szuszpenziót és az adhezív sejteket. A centrifugálás után óvatosan reszuszpendáljuk a sejtpelletet, és a sejtszuszpenziót helyezzük át friss tápfolyadékot tartalmazó új lombikokba.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Faj / alfaj
C57BL/6
Az adományozó életkora
1 hét