Prejsť na obsah
BV2
Tkanivo
Mozog
Synonymá
BV-2

Dokumenty

BV2

Cell line · Číslo výrobku 305156

BV2 cells are a type of microglial cell line derived from C57BL/6 murine, a widely used laboratory mouse strain for animal experiments. These microglial c...

€650.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky BV2 sú typom mikrogliovej bunkovej línie odvodenej od myší C57BL/6, čo je široko používaný kmeň laboratórnych myší na pokusy na zvieratách. Tieto mikrogliové bunky boli imortalizované pomocou retrovírusu J2, ktorý nesie onkogény v-raf a v-myc, čím vznikla stabilná bunková línia s jedinečnými vlastnosťami. Bunky BV2 exprimujú jadrové onkogény v-myc a cytoplazmatické v-RAF spolu s antigénom env gp70 na svojom povrchu, čo prispieva k ich úlohe pri imunitných reakciách a zápaloch v mozgu. Jednou z rozhodujúcich výhod buniek BV2 je ich schopnosť zachovať si morfologické a funkčné vlastnosti primárnej mikroglie, rezidentných imunitných buniek centrálneho nervového systému, čo z nich robí ideálny model na štúdium neurodegenerácie a zápalu mozgu.

Úloha mikroglií v neurodegenerácii, toxikológii a imunite, najmä pri ochoreniach, ako je Alzheimerova choroba, je stále sa rozvíjajúcou oblasťou biomedicínskeho výskumu. Tradičné štúdie sa často opierajú o primárne kultúry mikroglie a kontinuálne bunkové preparáty. Použitie bunkovej línie podobnej mikrogliam, ako sú bunky BV2, ponúka sľubnú alternatívu, pretože poskytuje kontinuálny a reprodukovateľný zdroj mikrogliam. Bunky BV2 vďaka expresii v-raf/v-myc vykazujú zvýšený metabolizmus a rast, čo je ideálne na výskum aktivácie a zápalu mikroglií. Ich expresia špecifických onkogénov a antigénov odráža makrofágy, vďaka čomu sú cenné na štúdium imunitných reakcií a mechanizmov ochorení.

Nedávne prehodnotenie myších mikrogliových buniek BV2 skúmalo ich vhodnosť ako náhrady primárnych mikroglií (PM). Odpoveď buniek BV2 na lipopolysacharid sa porovnávala s odpoveďou mikroglií v podmienkach in vitro aj in vivo, pričom však regulácia génov bola v priemere o niečo menej výrazná. BV2 bunky vykazovali normálnu reguláciu oxidu dusnatého a funkčnú odpoveď na IFN-gama, čo sú kritické parametre pre ich interakciu s T bunkami, neurónmi a inými gliovými bunkami, ako sú astrocyty. Zistilo sa tiež, že bunky BV2 účinne stimulujú iné gliové bunky, čo vedie k produkcii interleukínu-6 (IL-6) v astrocytoch.

Táto interakcia medzi astrocytmi a mikrogliami je kľúčová pre pochopenie komplexných interakcií medzi bunkami a zápalovou reakciou v mozgu, najmä v kontexte neurodegeneratívnych ochorení, ako je Alzheimerova choroba, kde proteíny ako NAPoe31 a NAPoe41, ako aj dráhy ako štartovacia reakcia a apoptóza zohrávajú významnú úlohu.

Bunky BV2 predstavujú robustný a spoľahlivý nástroj pre výskumníkov v oblasti mikrogliálnej biológie. Ich expresia produktov onkogénu v-raf/v-myc im umožňuje zachovať si kľúčové vlastnosti mikroglie a makrofágov. BV2 bunky sa ukázali ako platná náhrada primárnej mikroglie v rôznych experimentálnych podmienkach, čo uľahčuje výskum neurodegenerácie, toxikológie, imunity a interakcií medzi bunkami.

Tkanivo
Mozog
Synonymá
  • BV-2

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Morfológia mikroglií

04Identifikátory

Citácia
BV2 (katalógové číslo Cytion 305156)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0182

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Zhromaždite suspenzné bunky do 15 ml skúmavky a jemne premyte priľnuté bunky PBS bez vápnika a horčíka (použite 3-5 ml pre banky T25 a 5-10 ml pre banky T75). Aplikujte Accutase (1 - 2 ml pre banky T25, 2,5 ml pre banky T75), aby ste zabezpečili úplné pokrytie bunkovej vrstvy. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 10 minút. Po inkubácii spojte a odstreďte suspenziu aj adherované bunky. Po odstredení opatrne resuspendujte bunkovú peletu a preneste bunkovú suspenziu do nových baniek obsahujúcich čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Plemeno / poddruh
C57BL/6
Vek darcu
1 týždeň