BV2

BV2 rakud on mikrogliarakkude liin, mis on saadud C57BL/6 hiirtest, mis on loomkatsetes laialdaselt kasutatav laborihiiretüvi. Need mikrogliarakud on immortaliseeritud, kasutades J2 retroviirust, mis kannab v-raf ja v-myc onkogeene, mille tulemuseks on unikaalsete omadustega stabiilne rakuliin. BV2 rakud ekspresseerivad tuuma v-myc ja tsütoplasma v-RAF onkogeene koos env gp70 antigeeniga oma pinnal, mis aitab kaasa nende rollile immuunreaktsioonides ja põletikus ajus. Üks BV2 rakkude kriitilisi eeliseid on nende võime säilitada kesknärvisüsteemi residendist immuunrakkude, primaarse mikroglia morfoloogilised ja funktsionaalsed omadused, mis teeb neist ideaalse mudeli neurodegeneratsiooni ja ajupõletiku uurimiseks.

Mikroglia roll neurodegeneratsioonis, toksikoloogias ja immuunsuses, eriti sellistes seisundites nagu Alzheimeri tõbi, on biomeditsiiniuuringute üha kasvav valdkond. Traditsioonilised uuringud tuginevad sageli primaarsetele mikroglia kultuuridele ja pidevatele rakupreparaatidele. Mikroglia-taoliste rakuliinide, näiteks BV2 rakkude kasutamine pakub paljulubavat alternatiivi, kuna see pakub pidevat ja korratavat mikroglia allikat. BV2 rakud näitavad tänu v-raf/v-myc ekspressioonile tõhustatud ainevahetust ja kasvu, mis on ideaalne mikroglia aktiveerimise ja põletiku uurimisel. Nende spetsiifiliste onkogeenide ja antigeenide ekspressioon peegeldab makrofaage, mistõttu on nad väärtuslikud immuunvastuste ja haiguste mehhanismide uurimiseks.

Hiirte BV2 mikrogliarakkude hiljutises ümberhindamises uuriti nende sobivust primaarse mikroglia (PM) asendajana. BV2-rakkude reaktsiooni lipopolüsahhariidile võrreldi mikroglia reaktsiooniga nii in vitro kui ka in vivo, kusjuures geenide ülereguleerimine oli keskmiselt veidi vähem väljendunud. BV2 rakud näitasid normaalset lämmastikoksiidi regulatsiooni ja funktsionaalset vastust IFN-gammale, mis on kriitilised parameetrid nende koostoimimiseks T-rakkude, neuronite ja teiste gliarakkude, näiteks astrotsüütidega. Samuti leiti, et BV2 rakud stimuleerivad tõhusalt teisi gliarakke, mis viib interleukiin-6 (IL-6) tootmisele astrotsüütides.

See astrotsüütide ja mikroglia vaheline koostoime on oluline, et mõista keerulisi rakkude ja rakkude vastastikmõjusid ja põletikuvastust ajus, eriti selliste neurodegeneratiivsete haiguste nagu Alzheimeri tõbi kontekstis, kus sellised valgud nagu NAPoe31 ja NAPoe41, samuti sellised teed nagu startle-reaktsioon ja apoptoos, mängivad olulist rolli.

BV2 rakud pakuvad mikroglia bioloogiat uurivatele teadlastele tugevat ja usaldusväärset vahendit. Nende v-raf/v-myc onkogeeni toodete ekspressioon võimaldab neil säilitada mikroglia ja makrofaagide põhilised omadused. BV2 rakud on osutunud erinevates katsetes primaarse mikroglia kehtivaks asendajaks, hõlbustades neurodegeneratsiooni, toksikoloogia, immuunsuse ja rakkude ja rakkude koostoimete uurimist.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest