Ga naar de inhoud
BV2
Weefsel
Hersenen
Synoniemen
BV-2

Documenten

BV2

Cell line · Productnummer 305156

BV2 cells are a type of microglial cell line derived from C57BL/6 murine, a widely used laboratory mouse strain for animal experiments. These microglial c...

€650.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

BV2 cellen zijn een type microgliale cellijn afkomstig van C57BL/6 murine, een veelgebruikte laboratorium muizenstam voor dierproeven. Deze microgliale cellen zijn geïmmortaliseerd met behulp van het J2 retrovirus, dat drager is van de v-raf en v-myc oncogenen, wat resulteert in een stabiele cellijn met unieke eigenschappen. BV2-cellen brengen nucleaire v-myc en cytoplasmatische v-RAF oncogenen tot expressie, samen met het env gp70 antigen op hun oppervlak, wat bijdraagt aan hun rol in immuunreacties en ontstekingen in de hersenen. Een van de cruciale voordelen van BV2 cellen is hun vermogen om de morfologische en functionele kenmerken van primaire microglia, de inwonende immuuncellen van het centrale zenuwstelsel, te behouden, waardoor ze een ideaal model vormen voor het bestuderen van neurodegeneratie en hersenontsteking.

De rol van microglia in neurodegeneratie, toxicologie en immuniteit, in het bijzonder bij aandoeningen zoals de ziekte van Alzheimer, is een steeds groeiend gebied in biomedisch onderzoek. Traditionele studies zijn vaak gebaseerd op primaire microglia culturen en continue celpreparaten. Het gebruik van een microglia-achtige cellijn, zoals BV2 cellen, biedt een veelbelovend alternatief doordat het een continue en reproduceerbare bron van microglia biedt. BV2-cellen vertonen door v-raf/v-myc expressie een verbeterd metabolisme en groei, ideaal voor onderzoek naar microglia-activatie en ontsteking. Hun expressie van specifieke oncogenen en antigenen weerspiegelt macrofagen, waardoor ze waardevol zijn voor het bestuderen van immuunreacties en ziektemechanismen.

Een recente herevaluatie van BV2 microgliacellen van muizen onderzocht hun geschiktheid als vervanging voor primaire microglia (PM). De respons van BV2 cellen op lipopolysaccharide werd vergeleken met die van microglia in zowel in vitro als in vivo instellingen, waarbij de upregulatie van genen gemiddeld iets minder uitgesproken was. BV2-cellen vertoonden een normale regulatie van stikstofmonoxide en een functionele respons op IFN-gamma, kritieke parameters voor hun interactie met T-cellen, neuronen en andere gliacellen zoals astrocyten. BV2-cellen bleken ook andere gliacellen effectief te stimuleren, wat leidde tot de productie van interleukine-6 (IL-6) in astrocyten.

Deze interactie tussen astrocyten en microglia is cruciaal voor het begrijpen van de complexe cel-cel interacties en de ontstekingsreactie in de hersenen, vooral in de context van neurodegeneratieve ziekten zoals de ziekte van Alzheimer, waar eiwitten zoals NAPoe31 en NAPoe41, evenals routes zoals de schrikreactie en apoptose, een belangrijke rol spelen.

BV2 cellen bieden een robuust en betrouwbaar hulpmiddel voor onderzoekers in microgliale biologie. Doordat ze v-raf/v-myc oncogenen tot expressie brengen, behouden ze belangrijke kenmerken van microglia en macrofagen. BV2-cellen hebben bewezen een goede vervanging te zijn voor primaire microglia in verschillende experimentele settings, waardoor onderzoek naar neurodegeneratie, toxicologie, immuniteit en cel-cel interacties vergemakkelijkt wordt.

Weefsel
Hersenen
Synoniemen
  • BV-2

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Morfologie microgliaal

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
BV2 (Cytion catalogusnummer 305156)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0182

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verzamel de suspensiecellen in een buis van 15 ml en was de aanhangende cellen voorzichtig met PBS zonder calcium en magnesium (gebruik 3-5 ml voor T25-flesjes en 5-10 ml voor T75-flesjes). Breng Accutase aan (1-2 ml voor T25-flesjes, 2,5 ml voor T75-flesjes) en zorg dat de cellaag volledig bedekt wordt. Laat de cellen 10 minuten bij kamertemperatuur incuberen. Na de incubatie zowel de suspensie als de aanhangende cellen combineren en centrifugeren. Na het centrifugeren de celpellet voorzichtig resuspenderen en de celsuspensie overbrengen in nieuwe kolven met vers medium.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Soort / ondersoort
C57BL/6
Leeftijd van de donor
1 week