BV2

Komórki BV2 są rodzajem linii komórek mikrogleju pochodzącej od myszy C57BL/6, szeroko stosowanego szczepu myszy laboratoryjnych do eksperymentów na zwierzętach. Te komórki mikrogleju zostały unieśmiertelnione przy użyciu retrowirusa J2, który przenosi onkogeny v-raf i v-myc, w wyniku czego powstała stabilna linia komórkowa o unikalnych właściwościach. Komórki BV2 wyrażają jądrowe onkogeny v-myc i cytoplazmatyczne v-RAF, wraz z antygenem env gp70 na ich powierzchni, przyczyniając się do ich roli w odpowiedziach immunologicznych i stanach zapalnych w mózgu. Jedną z kluczowych zalet komórek BV2 jest ich zdolność do zachowania cech morfologicznych i funkcjonalnych pierwotnych mikrogleju, rezydentnych komórek odpornościowych ośrodkowego układu nerwowego, co czyni je idealnym modelem do badania neurodegeneracji i zapalenia mózgu.

Rola mikrogleju w neurodegeneracji, toksykologii i odporności, szczególnie w stanach takich jak choroba Alzheimera, jest stale rozwijającą się dziedziną badań biomedycznych. Tradycyjne badania często opierają się na pierwotnych hodowlach mikrogleju i ciągłych preparatach komórkowych. Wykorzystanie linii komórek podobnych do mikrogleju, takich jak komórki BV2, stanowi obiecującą alternatywę, zapewniając ciągłe i powtarzalne źródło mikrogleju. Komórki BV2, ze względu na ekspresję v-raf/v-myc, wykazują zwiększony metabolizm i wzrost, idealny do badań nad aktywacją mikrogleju i stanem zapalnym. Ich ekspresja specyficznych onkogenów i antygenów odzwierciedla makrofagi, co czyni je cennymi do badania odpowiedzi immunologicznych i mechanizmów chorobowych.

Niedawna ponowna ocena mysich komórek mikrogleju BV2 zbadała ich przydatność jako substytutu pierwotnych mikrogleju (PM). Odpowiedź komórek BV2 na lipopolisacharyd porównano z odpowiedzią mikrogleju zarówno w warunkach in vitro, jak i in vivo, przy czym regulacja genów była średnio nieco mniej wyraźna. Komórki BV2 wykazywały prawidłową regulację tlenku azotu i funkcjonalną odpowiedź na IFN-gamma, parametry krytyczne dla ich interakcji z limfocytami T, neuronami i innymi komórkami glejowymi, takimi jak astrocyty. Stwierdzono również, że komórki BV2 skutecznie stymulują inne komórki glejowe, prowadząc do produkcji interleukiny-6 (IL-6) w astrocytach.

Ta interakcja między astrocytami i mikroglejem ma kluczowe znaczenie dla zrozumienia złożonych interakcji komórka-komórka i odpowiedzi zapalnej w mózgu, zwłaszcza w kontekście chorób neurodegeneracyjnych, takich jak choroba Alzheimera, w których białka takie jak NAPoe31 i NAPoe41, a także szlaki, takie jak reakcja startowa i apoptoza, odgrywają znaczącą rolę.

Komórki BV2 stanowią solidne i niezawodne narzędzie dla badaczy biologii mikrogleju. Ekspresja onkogenów v-raf/v-myc umożliwia im zachowanie kluczowych cech mikrogleju i makrofagów. Komórki BV2 okazały się być ważnym substytutem pierwotnych mikrogleju w różnych warunkach eksperymentalnych, ułatwiając badania nad neurodegeneracją, toksykologią, odpornością i interakcjami komórka-komórka.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym