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Eca-109
Tessuto
Esofago
Malattia
Carcinoma a cellule squamose
Sinonimi
Eca109, Eca 109, EC-109, EC109

Documenti

Eca-109

Cell line · Codice prodotto 305511

Eca-109 è una linea cellulare derivata dal carcinoma a cellule squamose dell'esofago umano (ESCC) ampiamente utilizzata nella ricerca sul cancro, in particolare negli studi incentrati sui fattori tumorali...

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01Informazioni generali

Descrizione

L'Eca-109 è una linea cellulare di carcinoma esofageo umano a cellule squamose (ESCC) ampiamente utilizzata per la ricerca sul cancro, in particolare per studi incentrati sulla progressione tumorale, sulla migrazione cellulare e sull'apoptosi. Questa linea cellulare costituisce un modello rappresentativo del cancro esofageo, che rappresenta un problema sanitario significativo con un alto tasso di mortalità dovuto alla progressione aggressiva e alla prognosi infausta.

Nella ricerca sulle cellule Eca-109 sono state studiate diverse vie critiche. Ad esempio, è stato dimostrato che la modulazione dell'autofagia influenza la radiosensibilità. È stato dimostrato che l'inibizione dell'autofagia nelle cellule Eca-109, utilizzando agenti come la 3-metiladenina (3-MA) o LY294002, potenzia gli effetti citotossici delle radiazioni ionizzanti promuovendo l'apoptosi attraverso vie mitocondriali, tra cui il rilascio di citocromo c e l'attivazione delle caspasi. Inoltre, alcuni studi hanno evidenziato il ruolo della via di segnalazione EGFR/ERK1/2 nel promuovere la migrazione e l'invasività di queste cellule, con la scoperta che la stimolazione di EGF aumenta l'espressione dell'acquaporina-8 (AQP8), facilitando la migrazione cellulare.

Un altro aspetto significativo della ricerca sull'Eca-109 è l'esplorazione di bersagli terapeutici, come la galectina-3. La sovraespressione di questa proteina nelle cellule Eca-109 è stata associata a un aumento della proliferazione, della migrazione e dell'invasione cellulare e a una contemporanea riduzione dell'apoptosi, indicando il suo potenziale come bersaglio molecolare per il trattamento.

Tessuto
Esofago
Malattia
Carcinoma a cellule squamose
Sinonimi
  • Eca109
  • Eca 109
  • EC-109
  • EC109

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio

04Identificatori

Riferimento bibliografico
Eca-109 (numero di catalogo Cytion 305511)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6898

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
Non specificato
Etnia
Cinese