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Eca-109
Tecido
Esófago
Doença
Carcinoma de células escamosas
Sinónimos
Eca109, Eca 109, EC-109, EC109

Documentos

Eca-109

Cell line · Número do produto 305511

A Eca-109 é uma linha celular de carcinoma de células escamosas do esófago humano (ESCC) amplamente utilizada na investigação sobre o cancro, nomeadamente em estudos centrados na pró...

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01Informações gerais

Descrição

A Eca-109 é uma linha celular de carcinoma espinocelular do esófago humano (ESCC) que é amplamente utilizada na investigação do cancro, particularmente em estudos centrados na progressão tumoral, migração celular e apoptose. Esta linha celular constitui um modelo representativo do cancro do esófago, que constitui um importante problema de saúde com uma elevada taxa de mortalidade devido a uma progressão agressiva e a um mau prognóstico.

Na investigação que envolveu as células Eca-109, foram estudadas várias vias críticas. Por exemplo, foi demonstrado que a modulação da autofagia influencia a radiossensibilidade. Foi demonstrado que a inibição da autofagia nas células Eca-109, utilizando agentes como a 3-metiladenina (3-MA) ou o LY294002, aumenta os efeitos citotóxicos da radiação ionizante, promovendo a apoptose através de vias mitocondriais, incluindo a libertação do citocromo c e a ativação da caspase. Além disso, estudos destacaram o papel da via de sinalização EGFR/ERK1/2 na promoção da migração e da invasividade dessas células, com descobertas de que a estimulação do EGF aumenta a expressão da aquaporina-8 (AQP8), facilitando a migração celular.

Outro aspeto importante da investigação do Eca-109 é a exploração de alvos terapêuticos, como a galectina-3. A sobreexpressão desta proteína nas células Eca-109 foi associada a uma maior proliferação, migração e invasão celular, reduzindo simultaneamente a apoptose, o que indica o seu potencial como alvo molecular para tratamento.

Tecido
Esófago
Doença
Carcinoma de células escamosas
Sinónimos
  • Eca109
  • Eca 109
  • EC-109
  • EC109

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial

04Identificadores

Referência
Eca-109 (número de catálogo Cytion 305511)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6898

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
Não especificado
Etnia
Chinês