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HEK293-CLDN6
Tessuto
Rene fetale
Malattia
Trasformato/immortalizzato; non tumorigenico (linea cellulare HEK293)

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HEK293-CLDN6

Cell line · Codice prodotto 305985

Avviso legale: I prezzi indicati per le linee cellulari sono riservati esclusivamente a clienti del settore accademico o senza scopo di lucro. Per le entità commerciali, il prezzo...

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01Informazioni generali

Descrizione

Avviso: I prezzi indicati per le linee cellulari sono riservati esclusivamente a clienti del settore accademico o senza scopo di lucro. Per le entità commerciali il prezzo è di circa 6.250 €.
Se rappresenti un'entità commerciale o non sei sicuro di quale categoria ti riguardi, ti preghiamo di contattarci.


Le cellule HEK293-CLDN6 sono cellule renali embrionali umane 293 (HEK293) ingegnerizzate per esprimere in modo stabile la claudina-6 umana (CLDN6), una proteina transmembrana associata alle giunzioni strette appartenente alla famiglia delle claudine. La CLDN6 è normalmente espressa durante lo sviluppo embrionale e fetale, ma è in gran parte assente nella maggior parte dei tessuti adulti sani, il che la rende un interessante antigene oncofetale per la terapia mirata contro il cancro. Una riepressione aberrante di CLDN6 è stata identificata in diverse neoplasie, tra cui il cancro ovarico, i tumori delle cellule germinali testicolari, il cancro dell'endometrio, il cancro gastrico e alcuni sarcomi. I modelli stabili HEK293-CLDN6 forniscono un sistema controllato per lo studio della biologia di CLDN6 e la valutazione di approcci terapeutici diretti contro CLDN6.

Le cellule HEK293-CLDN6 sono ampiamente utilizzate nella ricerca oncologica e nello sviluppo di farmaci per la caratterizzazione di anticorpi monoclonali, coniugati anticorpo-farmaco, anticorpi bispecifici, terapie con cellule CAR-T e altre piattaforme di cellule immunitarie ingegnerizzate che prendono di mira CLDN6. Il sistema di espressione ricombinante stabile supporta la valutazione quantitativa dell'affinità di legame dell'antigene, della densità dei recettori, dell'internalizzazione degli anticorpi, della specificità dell'epitopo e della citotossicità dipendente dal bersaglio. Queste cellule sono comunemente utilizzate anche nello sviluppo di test di citometria a flusso, test reporter, screening terapeutico ad alta produttività e nella validazione di agenti di imaging mirati a CLDN6. Poiché le cellule HEK293 presentano un'elevata efficienza di trasfezione e una robusta espressione proteica, forniscono una piattaforma affidabile per la produzione di proteine di membrana ricombinanti e la generazione di test standardizzati.

Tessuto
Rene fetale
Malattia
Trasformato/immortalizzato; non tumorigenico (linea cellulare HEK293)
Applicazioni
Sviluppo di anticorpi mirati a CLDN6 e di ADC; terapia con cellule CAR-T; saggi ADCC/CDC; citometria a flusso; ricerca sugli antigeni oncofetali; terapie per i tumori ovarici e delle cellule germinali

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a CLDN6 expression construct for oncofetal antigen studies and targeted therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tipo di cellula
Cellule epiteliali
Tempo di raddoppio
circa 24-36 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
HEK293-CLDN6 (codice catalogo Cytion 305985)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_D2TL

05Espressione e suscettibilità

Recettori espressi
CLDN6

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con 10% FBS, 1 mM sodio piruvato, 10 mM HEPES, 1% NEAA. Aggiungere Geneticina (G418-Sulfat) per ottenere una concentrazione finale di 1 mg/mL.
Reagente di dissociazione
Tripsina-EDTA
Subcoltura
Per la coltura di routine di cellule aderenti: Aspirare il vecchio terreno di coltura dalle cellule aderenti e lavarle con PBS per rimuovere il terreno residuo. Dopo aver aspirato il PBS, aggiungere il volume appropriato di soluzione di tripsina/EDTA in base alle dimensioni del recipiente di coltura (ad esempio, 1 ml per una fiasca T25, 3 ml per una fiasca T75) e incubare a temperatura ambiente o a 37°C fino al distacco delle cellule (5-10 minuti). Monitorare il distacco al microscopio e, se necessario, picchiettare delicatamente il contenitore per liberare le cellule. Una volta staccate, aggiungere terreno completo per inattivare la tripsina/EDTA, risospendere delicatamente le cellule e trasferire un'aliquota della sospensione cellulare in un nuovo recipiente di coltura contenente terreno fresco. Porre il recipiente in un incubatore a 37°C con il 5% diCO2 e cambiare il terreno ogni 2-3 giorni.
Rapporto di frazionamento
Da 1 a 5
Densità di semina
Da 2 a 4 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento

Dopo lo scongelamento, dividere le cellule in un rapporto da 1:2 a 1:3 in fiasche T25 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano (per le colture aderenti) per almeno 24 ore.

Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
Feto