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SU-DHL-1
Tessuto
Versamento pleurico
Malattia
Linfoma anaplastico a grandi cellule, ALK-positivo
Sinonimi
SU-DHL1, SUDHL1, SUDHL-1, SuDHL-1, SuDHL 1, Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1

Documenti

SU-DHL-1

Cell line · Codice prodotto 305876

SU-DHL-1 è una linea cellulare derivata da un linfoma anaplastico a grandi cellule (ALCL) umano, ottenuta dal versamento pleurico di un bambino a cui era stata diagnosticata una linfopatia istiocitica diffusa...

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01Informazioni generali

Descrizione

SU-DHL-1 è una linea cellulare umana di linfoma anaplastico a grandi cellule (ALCL) ottenuta dal versamento pleurico di un bambino con diagnosi di linfoma istiocitico diffuso. È stata una delle prime linee di linfoma umano stabilite in coltura continua ed è stata rigorosamente caratterizzata sia fenotipicamente che geneticamente. Morfologicamente, la SU-DHL-1 conserva le caratteristiche del tumore primario, tra cui grandi vacuoli citoplasmatici contenenti lipidi. Gli studi istochimici mostrano l'attività di esterasi e fosfatasi acida non specifiche. A differenza delle linee cellulari linfoblastoidi, la SU-DHL-1 è negativa per l'antigene nucleare del virus di Epstein-Barr (EBNA) e non esprime immunoglobuline di superficie, il che la distingue ulteriormente dalle linee derivate da linfociti B.

SU-DHL-1 è un modello di riferimento per l'ALCL ALK-positivo a causa della traslocazione cromosomica t(2;5)(p23;q35), che porta all'espressione della proteina di fusione NPM1-ALK. Questa fusione conferisce un'attività tirosin-chinasica costitutiva e svolge un ruolo centrale nell'oncogenesi dell'ALK+ ALCL. La linea cellulare fa parte del pannello LL-100, una serie curata di modelli di leucemia e linfoma per la profilazione molecolare ad alto rendimento. SU-DHL-1 è stato ampiamente utilizzato in studi relativi alla segnalazione oncogenica, allo sviluppo di terapie mirate e alla regolazione trascrizionale nell'ALCL, diventando così uno strumento fondamentale per la comprensione e il trattamento di questo sottotipo di linfoma a cellule T aggressivo.

Tessuto
Versamento pleurico
Malattia
Linfoma anaplastico a grandi cellule, ALK-positivo
Sinonimi
  • SU-DHL1
  • SUDHL1
  • SUDHL-1
  • SuDHL-1
  • SuDHL 1
  • Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Linfoblasto-simile
Tipo di cellula
Cellula istiocitica
Tempo di raddoppio
~40-50 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
SU-DHL-1 (numero di catalogo Cytion 305876)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0538

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
Marcatore monocitario: CD163+ Marcatore linfoide: CD45- Marcatori di progenitori: CD10-, CD34- Marcatori di attivazione: CD30+, CD25+, CD70+, CD71+, CD80-, HLA-DR+, CD45- Marcatori delle cellule T: CD2-, CD3-, CD4-, CD5+, CD7-, CD8- Marcatori delle cellule B: CD19-, CD20-, CD21-, CD22- Marcatori mielomonocitari: CD11b-, CD11c-, CD13-, CD14-, CD15-, CD33-
Oncogeni
C-fms (proto-oncogene); bcl-6+ (c-onc)
Profilo mutazionale
Mutazione: Fusione genica, ALK + HGNC, NPM1, Nome(i) =NPM1-ALK (PubMed=7824924, PubMed=9121481, PubMed=25485619, PubMed=26657151, PubMed=29899875). Mutazione, TP53, semplice, p.Arg273His (c.818G>A), eterozigote (Cosmic-CLP=909742).

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
-
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
10 anni
Etnia
Caucasico