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SNU-5
Tessuto
Gastrico
Malattia
Adenocarcinoma
Sito metastatico
Ascite
Sinonimi
SNU5, NCI-SNU-5

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SNU-5

Cell line · Codice prodotto 305633

The SNU-5 cell line is a human gastric carcinoma model established from a metastatic lesion. It has been characterized for its molecular abnormalities, pa...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare SNU-5 è un modello di carcinoma gastrico umano ottenuto da una lesione metastatica. È stata caratterizzata per le sue anomalie molecolari, in particolare quelle che coinvolgono il gene oncosoppressore p53. Gli studi dimostrano che SNU-5 presenta una delezione del trascritto del gene p53, come determinato dall'assenza di mRNA p53 nelle analisi Northern blot. Questa perdita è stata ulteriormente confermata dai test di protezione RNasi e dal sequenziamento, che hanno rivelato che SNU-5 non presenta mutazioni rilevabili nelle regioni codificanti, ma non esprime affatto il trascritto, indicando un possibile meccanismo regolatorio o epigenetico di silenziamento genico piuttosto che una mutazione strutturale.

Le analisi proteomiche hanno fornito approfondimenti sulle caratteristiche molecolari di SNU-5. Studi su larga scala hanno incluso SNU-5 in un panel di linee cellulari tumorali utilizzate per mappare il proteoma delle linee cellulari tumorali umane. In questo contesto, SNU-5 contribuisce a set di dati che integrano la quantificazione basata sulla spettrometria di massa di migliaia di proteine. Questi set di dati proteomici sono stati correlati con profili trascrittomici, genomici e fenotipici, offrendo una visione completa dell'espressione proteica, della regolazione post-trascrizionale e delle caratteristiche di risposta ai farmaci. Tali set di dati posizionano SNU-5 come un modello prezioso per lo studio della biologia del cancro gastrico, in particolare nel contesto della malattia metastatica e della disregolazione della via p53.

Tessuto
Gastrico
Malattia
Adenocarcinoma
Sito metastatico
Ascite
Applicazioni
coltura cellulare 3D, ricerca sul cancro
Sinonimi
  • SNU5
  • NCI-SNU-5

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Sospensione
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This 4T1 carcinoma derivative contains a-Luc reporter construct introduced by lentiviral transduction, enabling bioluminescent tumor monitoring. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Linfoblasto-simile
Tipo di cellula
Linfoblasto
Tempo di raddoppio
34 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
SNU-5 (numero di catalogo Cytion 305633)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0078

05Espressione e suscettibilità

Profilo mutazionale
Mutazione: CDKN2A, semplice, p.Arg80Ter (c.238C>T) (p.Pro94Leu, c.281C>T), omozigote; Mutazione: TP53, semplice, p.Gly262_Ser269delGlyAsnLeuLeuGlyArgAsnSer (c.784_807del24), non specificata

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
IMDM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 25 mM di HEPES, w: 1,0 mM di piruvato di sodio, w: 3,024 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820800a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 20% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Raccogliere le cellule in una provetta da 15 ml e centrifugare, aspirare il terreno di coltura, risospendere i pellet, dispensare le cellule nella fiasca di coltura.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
33 anni
Etnia
Coreano