Pereiti prie turinio
Colo-94H ląstelės
Audinys
Storosios žarnos
Liga
Adenokarcinoma
Sinonimai
COLO-94H, COLO 94H, COLO94H

Dokumentai

Colo-94H ląstelės

Cell line · Prekės numeris 300161

COLO-94H ląstelių linija yra žmogaus storosios žarnos adenokarcinomos ląstelių linija, gauta iš suaugusio paciento metastazės židinio. Šios ląstelės yra epitelinio pobūdžio...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

COLO-94H ląstelių linija yra žmogaus storosios žarnos adenokarcinomos ląstelių linija, gauta iš suaugusio paciento metastazių vietos. Šios ląstelės yra epitelinės ir pasižymi storosios žarnos vėžiui būdingomis savybėmis, todėl yra vertingos vėžio biologijos, vaistų kūrimo ir metastazavimo mechanizmų tyrimams. COLO-94H ląstelės auga prigludusios ir sudaro monosluoksnį, kuris būdingas epitelinėms ląstelėms kultūroje. Jos pasižymi dideliu genetiniu ir fenotipiniu stabilumu, todėl galima atkurti rezultatus įvairiose eksperimentinėse sistemose.

Mokslininkai naudoja COLO-94H ląstelių liniją, kad ištirtų molekulinius ir ląstelinius kelius, susijusius su storosios žarnos vėžio progresavimu ir metastazėmis. Tai apima onkogenų, naviko slopintojų genų ir signalinių kelių, tokių kaip Wnt, Notch ir PI3K/AKT, poveikio tyrimus. Be to, COLO-94H ląstelės naudojamos naujų chemoterapinių preparatų ir tikslinių gydymo metodų veiksmingumui ir toksiškumui įvertinti, nes tai yra patikimas in vitro modelis ikiklinikiniams bandymams. Dėl jų metastazinės kilmės jos taip pat tinka vėžio ląstelių plitimo ir antrinių vietų kolonizacijos mechanizmų tyrimams.

Audinys
Storosios žarnos
Liga
Adenokarcinoma
Sinonimai
  • COLO-94H
  • COLO 94H
  • COLO94H

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Tumorogeninis
Taip, su nuogomis pelėmis

04Identifikatoriai

Nuoroda
COLO-94H (Cytion katalogo numeris 300161)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_4573

05Išraiška ir jautrumas

Mutacijų profilis
COLO-94H ląstelės turi Kras geno 12 kodono mutaciją: GGT(Wt Gly) >GAT(Asp)
Atvirkštinė transkriptazė
Neigiamas
Produktai
Citokeratinas 8, 18, 19

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
1-2 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
70 metų
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių