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Colo-94H-Zellen
Gewebe
Doppelpunkt
Krankheit
Adenokarzinom
Synonyme
COLO-94H, COLO 94H, COLO94H

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Colo-94H-Zellen

Cell line · Artikelnummer 300161

Die Zelllinie COLO-94H ist eine menschliche Kolorektal-Adenokarzinom-Zelllinie, die aus einer Metastase eines erwachsenen Patienten gewonnen wurde. Diese Zellen sind epithelialer Natur...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Bei der COLO-94H-Zelllinie handelt es sich um eine humane kolorektale Adenokarzinom-Zelllinie, die von einem metastasierenden Ort bei einem erwachsenen Patienten stammt. Diese Zellen sind epithelial und weisen typische Merkmale von Darmkrebs auf, was sie für Studien zur Krebsbiologie, Arzneimittelentwicklung und Metastasierungsmechanismen wertvoll macht. COLO-94H-Zellen wachsen adhärent und bilden eine Monolage, was typisch für Epithelzellen in Kultur ist. Sie weisen ein hohes Maß an genetischer und phänotypischer Stabilität auf, was reproduzierbare Ergebnisse in verschiedenen Versuchsanordnungen ermöglicht.

Forscher nutzen die COLO-94H-Zelllinie, um die molekularen und zellulären Signalwege zu untersuchen, die an der Progression und Metastasierung von Darmkrebs beteiligt sind. Dazu gehört die Untersuchung der Auswirkungen von Onkogenen, Tumorsuppressorgenen und Signalwegen wie Wnt, Notch und PI3K/AKT. Darüber hinaus werden COLO-94H-Zellen verwendet, um die Wirksamkeit und Toxizität neuer Chemotherapeutika und gezielter Therapien zu untersuchen, da sie ein zuverlässiges In-vitro-Modell für präklinische Tests darstellen. Aufgrund ihres metastatischen Ursprungs eignen sie sich auch für die Erforschung der Mechanismen der Verbreitung von Krebszellen und der Besiedlung sekundärer Stellen.

Gewebe
Doppelpunkt
Krankheit
Adenokarzinom
Synonyme
  • COLO-94H
  • COLO 94H
  • COLO94H

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Tumorauslösend
Ja, in Nacktmäusen

04Bezeichner

Quellenangabe
COLO-94H (Cytion Katalognummer 300161)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_4573

05Expression und Anfälligkeit

Mutationsprofil
COLO-94H-Zellen tragen eine Mutation im Codon 12 des Kras-Gens: GGT(Wt Gly) >GAT(Asp)
Reverse Transkriptase
Negativ
Produkte
Cytokeratine 8, 18, 19

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
1 bis 2 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und adhärieren lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
70 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch