Preskoči na vsebino
Celice Colo-94H
Tkivo
Debelo črevo
Bolezen
Adenokarcinom
Sinonimi
COLO-94H, COLO 94H, COLO94H

Dokumenti

Celice Colo-94H

Cell line · Številka izdelka 300161

Celična linija COLO-94H je človeška celična linija kolorektalnega adenokarcinoma, pridobljena iz metastaznega žarišča pri odraslem bolniku. Te celice so epitelijske narave...

€800.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija COLO-94H je celična linija človeškega kolorektalnega adenokarcinoma, pridobljena iz metastatskega mesta pri odraslem bolniku. Te celice so epitelijske narave in imajo značilnosti, značilne za kolorektalni rak, zaradi česar so dragocene za študije, usmerjene v biologijo raka, razvoj zdravil in metastatske mehanizme. Celice COLO-94H rastejo adherentno in tvorijo enosloj, kar je značilno za epitelijske celice v kulturi. Imajo visoko stopnjo genetske in fenotipske stabilnosti, kar omogoča ponovljive rezultate v različnih eksperimentalnih postavitvah.

Raziskovalci uporabljajo celično linijo COLO-94H za raziskovanje molekularnih in celičnih poti, ki sodelujejo pri napredovanju kolorektalnega raka in metastaziranju. To vključuje preučevanje učinkov onkogenov, tumorskih supresorskih genov in signalnih poti, kot so Wnt, Notch in PI3K/AKT. Poleg tega se celice COLO-94H uporabljajo za ocenjevanje učinkovitosti in toksičnosti novih kemoterapevtikov in ciljnih terapij, saj zagotavljajo zanesljiv in vitro model za predklinično testiranje. Zaradi njihovega metastatskega izvora so primerne tudi za raziskave mehanizmov širjenja rakavih celic in kolonizacije sekundarnih mest.

Tkivo
Debelo črevo
Bolezen
Adenokarcinom
Sinonimi
  • COLO-94H
  • COLO 94H
  • COLO94H

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, na golih miših

04Identifikatorji

Navajanje vira
COLO-94H (kataloška številka Cytion 300161)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4573

05Izražanje in dovzetnost

Profil mutacij
Celice COLO-94H imajo mutacijo v kodonu 12 gena Kras: GGT(Wt Gly) >GAT(Asp)
Reversna transkriptaza
Negativni
Izdelki
Citokeratin 8, 18, 19

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
1 do 2-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
70 let
Etnična pripadnost
Kavkaški