Gå til innholdet
Colo-94H-celler
Vev
Colon
Sykdom
Adenokarsinom
Synonymer
COLO-94H, COLO 94H, COLO94H

Dokumenter

Colo-94H-celler

Cell line · Produktnummer 300161

COLO-94H-cellelinjen er en human kolorektal adenokarsinomcellelinje som stammer fra et metastatisk område hos en voksen pasient. Disse cellene er epiteliale i sin natur...

€800.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

COLO-94H-cellelinjen er en human kolorektal adenokarsinomcellelinje som stammer fra et metastatisk område hos en voksen pasient. Disse cellene er epiteliale og har egenskaper som er typiske for kolorektal kreft, noe som gjør dem verdifulle for studier som fokuserer på kreftbiologi, legemiddelutvikling og metastatiske mekanismer. COLO-94H-celler vokser adherent og danner et monolag, noe som er typisk for epitelceller i kultur. De har en høy grad av genetisk og fenotypisk stabilitet, noe som gir reproduserbare resultater i ulike eksperimentelle oppsett.

Forskere bruker COLO-94H-cellelinjen til å undersøke de molekylære og cellulære veiene som er involvert i progresjon og metastasering av kolorektal kreft. Dette inkluderer studier av effekten av onkogener, tumorsuppressorgener og signalveier som Wnt, Notch og PI3K/AKT. I tillegg brukes COLO-94H-celler til å evaluere effekten og toksisiteten til nye kjemoterapeutiske midler og målrettede terapier, noe som gir en pålitelig in vitro-modell for preklinisk testing. Cellenes metastatiske opprinnelse gjør dem også egnet for forskning på mekanismene for spredning av kreftceller og kolonisering av sekundære steder.

Vev
Colon
Sykdom
Adenokarsinom
Synonymer
  • COLO-94H
  • COLO 94H
  • COLO94H

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorinduserende
Ja, i nakne mus

04Identifikatorer

Kildehenvisning
COLO-94H (Cytion-katalognummer 300161)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_4573

05Uttrykk og mottakelighet

Mutasjonsprofil
COLO-94H-celler bærer en mutasjon i kodon 12 i Kras-genet: GGT(Wt Gly) >GAT(Asp)
Revers transkriptase
Negativ
Produkter
Cytokeratin 8, 18, 19

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
1 til 2 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
70 år
Etnisitet
Kaukasisk