Skip to content
เซลล์ Colo-94H
Tissue
ลำไส้ใหญ่
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
COLO-94H, COLO 94H, COLO94H

Documents

เซลล์ Colo-94H

Cell line · Product number 300161

The COLO-94H cell line is a human colorectal adenocarcinoma cell line derived from a metastatic site in an adult patient. These cells are epithelial in na...

€800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายพันธุ์เซลล์ COLO-94H เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักของมนุษย์ที่ได้มาจากตำแหน่งแพร่กระจายในผู้ป่วยผู้ใหญ่ เซลล์เหล่านี้มีลักษณะเป็นเซลล์เยื่อบุผิวและแสดงลักษณะเฉพาะของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก ทำให้มีคุณค่าสำหรับการศึกษาชีววิทยาของมะเร็ง การพัฒนายา และกลไกการแพร่กระจายเซลล์ COLO-94H เติบโตแบบเกาะติดและสร้างชั้นเดียว ซึ่งเป็นลักษณะทั่วไปของเซลล์เยื่อบุผิวในวัฒนธรรมเซลล์ พวกมันมีความเสถียรทางพันธุกรรมและลักษณะทางฟีโนไทป์สูง ทำให้สามารถได้ผลลัพธ์ที่ซ้ำกันได้ในหลากหลายการทดลอง

นักวิจัยใช้สายพันธุ์เซลล์ COLO-94H เพื่อศึกษาเส้นทางโมเลกุลและเซลล์ที่เกี่ยวข้องกับการลุกลามและการแพร่กระจายของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักซึ่งรวมถึงการศึกษาผลกระทบของยีนก่อมะเร็ง ยีนกดการเกิดเนื้องอก และเส้นทางการส่งสัญญาณ เช่น Wnt, Notch และ PI3K/AKT นอกจากนี้ เซลล์ COLO-94H ยังถูกใช้ในการประเมินประสิทธิภาพและความเป็นพิษของยาเคมีบำบัดชนิดใหม่และการรักษาแบบมุ่งเป้า ซึ่งให้แบบจำลองในหลอดทดลองที่เชื่อถือได้สำหรับการทดสอบก่อนคลินิก ต้นกำเนิดของการแพร่กระจายของเซลล์ยังทำให้เซลล์เหล่านี้เหมาะสมสำหรับการวิจัยเกี่ยวกับกลไกการแพร่กระจายของเซลล์มะเร็งและการตั้งถิ่นฐานในตำแหน่งรอง

Tissue
ลำไส้ใหญ่
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
  • COLO-94H
  • COLO 94H
  • COLO94H

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่ไม่มีขน

04Identifiers

Citation
COLO-94H (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300161)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_4573

05Expression and susceptibility

Mutational profile
เซลล์ COLO-94H มีการกลายพันธุ์ในโคดอนที่ตำแหน่ง 12 ของยีน Kras: GGT(Wt Gly) >GAT(Asp)
Reverse transcriptase
เชิงลบ
Products
ไซโตเคราติน 8, 18, 19

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 10^4 เซลล์/ซม.^2
Fluid renewal
1 ถึง 2 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
70 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน