Células Colo-94H
Cell line · Product number 300161
The COLO-94H cell line is a human colorectal adenocarcinoma cell line derived from a metastatic site in an adult patient. These cells are epithelial in na...
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01General information
- Description
A linhagem celular COLO-94H é uma linhagem de adenocarcinoma colorretal humano derivada de um foco metastático em um paciente adulto. Essas células são de natureza epitelial e apresentam características típicas do câncer colorretal, o que as torna valiosas para estudos voltados para a biologia do câncer, o desenvolvimento de medicamentos e os mecanismos de metástase. As células COLO-94H crescem de forma aderente e formam uma monocamada, o que é típico de células epiteliais em cultura. Elas possuem um alto grau de estabilidade genética e fenotípica, permitindo resultados reproduzíveis em diversas configurações experimentais.
Pesquisadores utilizam a linhagem celular COLO-94H para investigar as vias moleculares e celulares envolvidas na progressão e metástase do câncer colorretal. Isso inclui o estudo dos efeitos de oncogenes, genes supressores de tumor e vias de sinalização, como Wnt, Notch e PI3K/AKT. Além disso, as células COLO-94H são utilizadas para avaliar a eficácia e a toxicidade de novos agentes quimioterápicos e terapias direcionadas, fornecendo um modelo in vitro confiável para testes pré-clínicos. Sua origem metastática também as torna adequadas para pesquisas sobre os mecanismos de disseminação das células cancerosas e colonização de sítios secundários.
- Tissue
- Dois pontos
- Disease
- Adenocarcinoma
- Synonyms
- COLO-94H
- COLO 94H
- COLO94H
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
- Tumourigenic
- Sim, em camundongos nude
04Identifiers
- Citation
- COLO-94H (número de catálogo da Cytion 300161)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_4573
05Expression and susceptibility
- Mutational profile
- As células COLO-94H apresentam uma mutação no códon 12 do gene Kras: GGT(Wt Gly) > GAT(Asp)
- Reverse transcriptase
- Negativo
- Products
- Citoqueratina 8, 18, 19
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), p/v: 3,1 g/L de glicose, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, peso: 0,5 mM de piruvato de sódio, peso: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Seeding density
- 1 x 104 células/cm²
- Fluid renewal
- 1 a 2 vezes por semana
- Post-thaw recovery
- Após o descongelamento, semeie as células a uma densidade de 5 x 10⁴ células/cm² e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se adiram por pelo menos 24 horas.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Donor age
- 70 anos
- Ethnicity
- caucasiano
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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