Células Colo-94H
Cell line · Número do produto 300161
A linha celular COLO-94H é uma linha celular de adenocarcinoma colorretal humano derivada de um foco metastático num doente adulto. Estas células são de natureza epitelial...
Personalização / Recomendações
- Células Colo-94HCell line€800.00
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01Informações gerais
- Descrição
A linha celular COLO-94H é uma linha celular de adenocarcinoma colorrectal humano derivada de um local metastático de um doente adulto. Estas células são de natureza epitelial e apresentam caraterísticas típicas do cancro colorrectal, o que as torna valiosas para estudos centrados na biologia do cancro, no desenvolvimento de medicamentos e nos mecanismos metastáticos. As células COLO-94H crescem de forma aderente e formam uma monocamada, o que é típico das células epiteliais em cultura. Possuem um elevado grau de estabilidade genética e fenotípica, permitindo a obtenção de resultados reprodutíveis em várias configurações experimentais.
Os investigadores utilizam a linha celular COLO-94H para investigar as vias moleculares e celulares envolvidas na progressão e metástase do cancro colorrectal. Isto inclui o estudo dos efeitos de oncogenes, genes supressores de tumores e vias de sinalização como Wnt, Notch e PI3K/AKT. Além disso, as células COLO-94H são utilizadas para avaliar a eficácia e a toxicidade de novos agentes quimioterapêuticos e de terapias direcionadas, proporcionando um modelo in vitro fiável para testes pré-clínicos. A sua origem metastática também as torna adequadas para a investigação dos mecanismos de disseminação das células cancerosas e de colonização de locais secundários.
- Tecido
- Cólon
- Doença
- Adenocarcinoma
- Sinónimos
- COLO-94H
- COLO 94H
- COLO94H
02Classificação
- Organismo
- Humano
- Sexo
- Masculino
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- De tipo epitelial
- Tumorigénico
- Sim, em ratinhos nus
04Identificadores
- Referência
- COLO-94H (número de catálogo Cytion 300161)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_4573
05Expressão e suscetibilidade
- Perfil mutacional
- As células COLO-94H são portadoras de uma mutação no códão 12 do gene Kras: GGT(Wt Gly) >GAT(Asp)
- Transcriptase reversa
- Negativo
- Produtos
- Citoqueratina 8, 18, 19
06Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 10% de FBS
- Reagente de dissociação
- Accutase
- Subcultura
- Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Densidade de sementeira
- 1 x 104 células/cm2
- Renovação de fluidos
- 1 a 2 vezes por semana
- Recuperação após o descongelamento
- Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
08Doador
- Idade do dador
- 70 anos
- Etnia
- Caucasiano
09Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim
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