Przejdź do treści
Ogniwa Colo-94H
Chusteczka
Colon
Choroba
Gruczolakorak
Synonimy
COLO-94H, COLO 94H, COLO94H

Dokumenty

Ogniwa Colo-94H

Cell line · Numer produktu 300161

Linia komórkowa COLO-94H to ludzka linia komórkowa gruczolakoraka jelita grubego, uzyskana z ogniska przerzutowego u dorosłego pacjenta. Komórki te mają charakter nabłonkowy...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa COLO-94H to ludzka linia komórkowa gruczolakoraka jelita grubego pochodząca z miejsca przerzutów u dorosłego pacjenta. Komórki te mają charakter nabłonkowy i wykazują cechy typowe dla raka jelita grubego, co czyni je cennymi w badaniach nad biologią raka, opracowywaniem leków i mechanizmami przerzutów. Komórki COLO-94H rosną przylegająco i tworzą monowarstwę, co jest typowe dla komórek nabłonkowych w hodowli. Charakteryzują się one wysokim stopniem stabilności genetycznej i fenotypowej, co pozwala na uzyskanie powtarzalnych wyników w różnych konfiguracjach eksperymentalnych.

Naukowcy wykorzystują linię komórkową COLO-94H do badania szlaków molekularnych i komórkowych zaangażowanych w progresję raka jelita grubego i przerzuty. Obejmuje to badanie wpływu onkogenów, genów supresorowych nowotworów i szlaków sygnałowych, takich jak Wnt, Notch i PI3K/AKT. Ponadto komórki COLO-94H są wykorzystywane do oceny skuteczności i toksyczności nowych środków chemioterapeutycznych i terapii celowanych, zapewniając wiarygodny model in vitro do badań przedklinicznych. Ich przerzutowe pochodzenie czyni je również odpowiednimi do badań nad mechanizmami rozprzestrzeniania się komórek nowotworowych i kolonizacji drugorzędnych miejsc.

Chusteczka
Colon
Choroba
Gruczolakorak
Synonimy
  • COLO-94H
  • COLO 94H
  • COLO94H

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
Tak, u nagich myszy

04Identyfikatory

Źródło
COLO-94H (numer katalogowy Cytion 300161)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_4573

05Ekspresja i podatność

Profil mutacji
Komórki COLO-94H są nosicielami mutacji w kodonie 12 genu Kras: GGT(Wt Gly) >GAT(Asp)
Transkryptaza odwrotna
Negatywny
Produkty
Cytokeratyna 8, 18, 19

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
1 do 2 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
70 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski