CAL27 ląstelės – išsamios įžvalgos apie galvos ir kaklo vėžį naudojant CAL27 ląsteles

CAL27 yra viena iš dažniausiai biomedicininiuose tyrimuose naudojamų burnos plokščialąstelinio karcinomo ląstelių linijų. Tai vertinga priemonė plokščialąstelinio vėžio sudėtingumų, įskaitant naviko augimą, vystymąsi ir pagrindinius ląstelių bei molekulių mechanizmus, tyrimams. Be to, ji taip pat palengvina vaistų atranką ir bandymus kuriant vaistus nuo vėžio.

CAL27 ląstelių kilmė ir bendrosios charakteristikos

Pirmas dalykas, kurį reikia žinoti apie ląstelių liniją, yra jos kilmė ir bendrosios charakteristikos, kurios ją išskiria iš kitų ląstelių linijų. Šiame straipsnio skyriuje pateikiama pagrindinė informacija apie CAL27 ląsteles. Sužinosite: kas yra CAL27 ląstelių modelis? Kas yra CAL27 HPV? Koks yra CAL27 HER2 statusas? Kokia yra CAL27 ląstelių linijos kilmė? Kokia yra CAL27 ląstelių morfologija? Koks yra CAL27 ląstelių dydis?

• Burnos plokščialąstelinio vėžio ląstelių linija CAL27 buvo sukurta iš 56 metų baltojo vyro, sergančio liežuvio plokščialąsteline karcinoma, liežuvio audinio. Ląstelių liniją 1982 m. sukūrė Gioanni ir jo kolegos [1].
• CAL27 vėžio ląstelės pasižymi epitelio tipo morfologija.
• Šios ląstelės turi aneuploidinį kariotipą. Jų modalusis chromosomų skaičius yra 43.

Mikroskopu stebimas plokščialąstelinio epitelio ląstelių masyvas.

Informacija apie CAL27 ląstelių linijos auginimą

Norint lengvai ir efektyviai prižiūrėti ląstelių liniją, būtina žinoti pagrindinius jos auginimo reikalavimus. Šiame skyriuje aptariamos svarbios CAL27 ląstelių linijos auginimo sąvokos. Turėtumėte žinoti: koks yra CAL27 ląstelių linijos dvigubėjimo laikas? Kas yra CAL27 ląstelių terpė? Koks yra CAL27 ląstelių linijos subkultivavimo santykis? Kokios yra CAL27 kultivavimo sąlygos? Kaip kultivuoti CAL27 ląsteles?

Pagrindiniai CAL27 ląstelių kultivavimo aspektai

Padvigubėjimo laikas:

CAL27 ląstelės auga vidutiniu greičiu, o populiacijos dvigubėjimo laikas yra maždaug 45 valandos.

Adhezinės ar suspensinės:

Šios daugiakampės CAL27 ląstelės prisitvirtina prie kultūros indo paviršiaus ir auga į monosluoksnius.

Padalijimo santykis:

CAL27 ląstelės subkultivuojamos 1:2–1:4 dalijimo santykiu. Subkultivavimui adhezinės ląstelės nuplaunamos magnio ir kalcio neturinčiu fosfato buferiniu tirpalu (1x). Po to ląstelės inkubuojamos su „Accutase“ (perkelimo tirpalu) kambario temperatūroje 8–10 minučių. Atsiskyrusios ląstelės įpilamos į šviežią terpę ir centrifuguojamos. Surinktas nuosėdas tada atsargiai resuspenduojamas ir supilamas į naujus kolbelius, kuriuose yra augimo terpė.

Augimo terpė:

CAL27 ląstelių linijai kultivuoti naudojama DMEM terpė, papildyta 10 % FBS, 4,5 g/l gliukozės, 4 mM L-glutamino, 1,5 g/l NaHCO3 ir 1,0 mM natrio piruvato. Terpę reikia keisti 2–3 kartus per savaitę.

Auginimo sąlygos:

CAL27 ląstelių kultūros laikomos 37 °C temperatūroje drėgname inkubatoriuje su 5 % CO2 tiekimu.

Laikymas:

Užšaldytos CAL27 ląstelės laikomos skysto azoto garų fazėje arba ilgiau – žemesnėje nei -150 °C temperatūroje ultražemoje šaldymo kameroje.

Užšaldymo procesas ir terpė:

CAL27 ląstelėms užšaldyti rekomenduojama CM-1 arba CM-ACF užšaldymo terpė. Tam rekomenduojamas lėtas užšaldymo procesas, kurio metu temperatūra mažėja tik 1 °C per minutę, siekiant išsaugoti ląstelių gyvybingumą.

Atšildymo procesas:

Užšaldytų ląstelių kolbos 40–60 sekundžių laikomos iš anksto 37 °C temperatūrai nustatytame vandens vonioje, kol lieka tik nedidelis ledo gabalėlis. Į ląsteles įpilama šviežios terpės ir jos centrifuguojamos. Po to pašalinama užšaldymo terpė, o ląstelių nuosėdos sumaišomos su šviežia auginimo terpe ir atsargiai resuspenduojamos. Tada ląstelės supilamos į naujus kolbelius augimui.

Biologinio saugumo lygis:

CAL27 ląstelių kultūros tvarkymui ir priežiūrai būtina 1 biologinio saugumo lygio laboratorija.

 

Išsamus CAL27 ląstelių vaizdas 10 ir 20 kartų didinimu, išryškinantis jų sudėtingą daugiakampę struktūrą.

CAL27 ląstelių linija: privalumai ir trūkumai

CAL27 yra plačiai naudojama plokščialąstelinio karcinomos ląstelių linija. Šiame skyriuje bus aptarti kai kurie svarbūs šių vėžinių ląstelių privalumai ir trūkumai.

Privalumai

Pagrindiniai CAL27 ląstelių linijos privalumai yra šie:

Tumorigeniškumas

CAL27 ląstelių linija turi tumorigeninį potencialą. Šios ląstelės gali sukelti navikų susidarymą, kai yra įšvirkščiamos į „nuogas“ arba imuninės sistemos sutrikimų turinčias peles. Tai gali padėti mokslininkams giliau suprasti navikų biologiją ir mikroaplinką.

Genetinės mutacijos

CAL27 ląstelėse yra specifinių genominių pokyčių, pvz., CAL27 P53, dažnai pasitaikančių burnos plokščialąstelinėje karcinomoje. Taigi, CAL27 naudojimas gali būti naudingas mokslininkams, tiriančiems šių mutacijų poveikį vėžio augimui, vystymuisi ir progresavimui.

Lengva auginti

Burnos plokščialąstelinė ląstelių linija CAL27 neturi sudėtingų ląstelių kultivavimo reikalavimų. Todėl ją lengva kultivuoti ir išlaikyti mokslinių tyrimų laboratorijose.

 

Trūkumai

Su CAL27 ląstelių linija susiję trūkumai yra šie:

In vitro modelis

CAL27 ląstelės naudojamos kaip burnos plokščialąstelinio karcinomo in vitro modelis. Tačiau svarbu pažymėti, kad jos gali netiksliai atspindėti pirminių plokščialąstelinio karcinomo navikų savybes ir sudėtingumą.

 

CAL27 ląstelių pritaikymas moksliniuose tyrimuose

CAL27 ląstelių linija turi platų pritaikymą biomedicininiuose tyrimuose. Čia išvardyti kai kurie svarbūs tyrimų pritaikymo pavyzdžiai.

• Vėžio biologija: CAL27 ląstelės plačiai naudojamos tirti molekulinius ir ląstelinės mechanizmus, lemiančius burnos plokščialąstelinio karcinomo (OSCC) vystymąsi ir progresavimą. Tyrėjai taip pat tiria genetines mutacijas, signalų perdavimo kelius ir svarbius biomarkerius, susijusius su plokščialąsteliniais navikais. 2021 m. atliktame tyrime buvo naudojamos CAL27 ląstelės ir tiriamas CD147 vaidmuo burnos plokščialąstelinio vėžio vystymuisi. Tyrimo rezultatai parodė, kad CD147 slopinimas sukėlė CAL27 ląstelių proliferacijos, migracijos ir invazijos slopinimą. Be to, jo slopinimas taip pat trukdo vėžio ląstelių atsparumo vaistams vystymuisi [2].
• Vaistų kūrimas: CAL27 ląstelių linija yra vertinga priemonė priešvėžinių vaistų atrankai ir bandymams. Mokslininkai naudoja šias ląsteles, kad ištirtų įvairių chemoterapinių preparatų, tikslinės terapijos ir eksperimentinių vaistų veiksmingumą slopinant burnos ertmės vėžio ląstelių proliferaciją, augimą ir gyvybingumą. Be to, buvo įvertintas potencialių priešvėžinių agentų moduliacinis poveikis sutrikusiems vėžio ląstelių signalizacijos keliams. Tai gali padėti kurti veiksmingus ir individualizuotus gydymo būdus kovai su liga. Viename tyrime buvo tiriamas cinko oksido nanodalelių priešvėžinis potencialas naudojant CAL27 ląsteles. Tyrimo rezultatai parodė, kad cinko oksido nanodalelės sukėlė citotoksinį poveikį ir taip pat indukavo PINK1/Parkin kelio mediatorių mitofagiją CAL27 liežuvio vėžio ląstelėse [3]. Panašiai mokslininkai stebėjo doksorubicino ir jo nanoformuluotės (Doxil) priešvėžinį potencialą CAL27 burnos plokščialąstelinio vėžio atveju [4].

5. Leidiniai, kuriuose aptariama CAL27 ląstelių linija

Šioje straipsnio dalyje bus aptarti keli įdomūs ir dažniausiai cituojami leidiniai apie CAL27 vėžio ląsteles:

CAL27 burnos plokščialąstelinio karcinomo ląstelių slopinimas, veikiant hedgehog signalų kelią vismodegibu arba itrakonazolu

Šis tyrimas buvo paskelbtas žurnale „Frontiers in Oncology“ (2020 m.). Tyrime buvo tiriamas vismodegibo arba itrakonazolo poveikis burnos plokščialąstelinei karcinomai, naudojant CAL27 ląsteles.  

PLAU skatina ląstelių proliferaciją ir epitelio-mezenchiminį perėjimą galvos ir kaklo plokščialąstelinėje karcinomoje

Šiame straipsnyje, paskelbtame žurnale „Frontiers in Genetics“ (2021 m.), teigiama, kad plazminogeno aktyviklis, urokinazės (PLAU) baltymas, skatina CAL27 ląstelių proliferaciją, migraciją ir epitelio-mezenchiminį perėjimą (EMT).

MikroRNR-145-5p sustiprina ląstelių apoptozę ir oksidacinį stresą liežuvio plokščialąstelinėje karcinomoje

Šiame straipsnyje, paskelbtame žurnale „Experimental and Therapeutic Medicine“ (2021 m.), nustatyta, kad miRNA-145-5p sustiprina CAL27 ląstelių oksidacinį stresą ir mirtį bei slopina PI3K/AKT signalizacijos kelią.

Augalinio ekstrakto morino priešvėžinis poveikis liežuvio plokščialąstelinio karcinomo ląstelėms

Šiame „Oncology Reports“ (2018) žurnale paskelbtame tyrime, naudojant CAL27 ląsteles, buvo tiriamas bioflavonoido, vadinamo morinu, priešvėžinis poveikis.

Burnos patogenų ir oksidacinės žalos sumažėjimas CAL 27 ląstelių linijoje naudojant Rosmarinus officinalis L. ir Taraxacum officinale Web. ekstraktus

Šiame straipsnyje, paskelbtame žurnale „Journal of Ethnopharmacology“ (2023 m.), buvo tiriamas Rosmarinus officinalis L. ir Taraxacum officinale ekstraktų terapinis potencialas CAL27 ląstelėse.

Ištekliai, skirti CAL27 ląstelių linijai: protokolai, vaizdo įrašai ir kita

Ištekliai apie CAL27 ląstelių liniją yra riboti. Šiame skyriuje pateikėme keletą bendrų protokolų, kurie taip pat gali padėti dirbti su CAL27 ląstelėmis:

• CAL27 ląstelių transfekcija: Šis vaizdo įrašas padės jums susipažinti su bendru plazmidinės DNR transfekcijos protokolu.
• Adhezyvinių ląstelių subkultūravimas: Šis vaizdo įrašas išsamiai supažindins jus su adhezyvinių ląstelių linijų subkultūravimu.

Šioje nuorodoje pateikiamas CAL27 ląstelių kultūros protokolas.

• CAL27 ląstelių linija: šioje svetainėje pateikiama informacija apie CAL27 terpę, sėjos tankį, dvigubėjimo laiką ir kt. Be to, joje pateikiamas protokolas, kaip atlikti subkultūravimą ir dirbti su besidauginančiomis bei kriokonservuotomis kultūromis.

Nuorodos

1. Liu, X., et al., LINC00472 slopina burnos plokščialąstelinio karcinomo augimą, veikdamas miR-455-3p/ELF3 ašį. Bioengineered, 2022. 13(1): p. 1162-1173.
2. Pan, S., et al., CD147 išjungimas slopina žmogaus burnos vėžio CAL27 ląstelių proliferaciją, invaziją ir atsparumą vaistams in vitro ir in vivo. International Journal of Biological Macromolecules, 2021. 181: p. 378-389.
3. Wang, J., et al., Cinko oksido nanodalelės sukelia toksiškumą CAL 27 burnos vėžio ląstelių linijose, aktyvuodamos PINK1/Parkin mediatorių mitofagiją. International Journal of Nanomedicine, 2018: p. 3441–3450.
4. Abd El-Hamid, E.S., A.M. Gamal-Eldeen ir A.M.S. Eldeen, Liposomomis padengtas nano doksorubicinas sukelia apoptozę burnos plokščialąstelinio karcinomo CAL-27 ląstelėse. Archives of oral biology, 2019. 103: p. 47–54.