Celice CAL27 – poglobljen vpogled v raka glave in vratu z uporabo celic CAL27

CAL27 je ena izmed najpogosteje uporabljenih celičnih linij za ploskokletni karcinom ustne votline v biomedicinskih raziskavah. Je dragoceno orodje za preučevanje zapletenosti ploskokletnih rakov, vključno z rastjo tumorja, razvojem ter osnovnimi celičnimi in molekularnimi mehanizmi. Poleg tega olajšuje tudi presejanje in testiranje zdravil za razvoj zdravil proti raku.

Izvor in splošne značilnosti celic CAL27

Prva stvar, ki jo morate vedeti o celični liniji, je njen izvor in splošne značilnosti, ki jo ločujejo od drugih celičnih linij. Ta del članka zajema osnovne informacije o celicah CAL27. Izvedeli boste: Kaj je celični model CAL27? Kaj je CAL27 HPV? Kakšen je status CAL27 HER2? Kakšen je izvor celične linije CAL27? Kakšna je morfologija celic CAL27? Kakšna je velikost celic CAL27?

• Celična linija raka ploskih celic ustne votline, CAL27, je bila razvita iz tkiva jezika 56-letnega belega moškega, pri katerem je bil ugotovljen ploskokletčni karcinom jezika. Celično linijo so leta 1982 vzpostavili Gioanni in njegovi sodelavci [1].
• Rakave celice CAL27 imajo epitelijsko podobno morfologijo.
• Te celice imajo aneuploidni kariotip. Imajo modalno število kromosomov 43.

Skupina ploščatih epitelnih celic, opazovanih pod mikroskopom.

Podatki o gojenju celične linije CAL27

Za enostavno in izvedljivo vzdrževanje celične linije morate poznati njene ključne zahteve za gojenje celic. Ta poglavje obravnava pomembne koncepte gojenja celic o celični liniji CAL27. Vedeti morate: Kakšen je čas podvojitve celične linije CAL27? Kaj je gojišče za celice CAL27? Kakšno je razmerje subkultivacije celične linije CAL27? Kakšni so pogoji za gojenje CAL27? Kako gojite celice CAL27?

Ključne točke za gojenje celic CAL27

Čas podvojitve:

Celice CAL27 kažejo zmerno hitrost rasti s časom podvojitve populacije približno 45 ur.

Adherentne ali v suspenziji:

Te poligonalne celice CAL27 se adhezivno pritrdijo na površino kultivacijskega posoda in rastejo v monosloje.

Razmerje delitve:

Celice CAL27 se subkultivirajo v razmerju delitve 1:2 do 1:4. Za subkultiviranje se adhezivne celice operejo s fosfatnim pufrom brez magnezija in kalcija (1x). Nato se celice inkubirajo z Accutase (raztopino za pasiranje) pri sobni temperaturi 8 do 10 minut. Odlepljenim celicam se doda svež medij in se centrifugirajo. Zbrani pelet se nato previdno ponovno suspendira in vlije v nove kolbe, ki vsebujejo rastni medij.

Rastno gojišče:

Za gojenje celične linije CAL27 se uporablja gojišče DMEM, dopolnjeno z 10 % FBS, 4,5 g/l glukoze, 4 mM L-glutamina, 1,5 g/l NaHCO3 in 1,0 mM natrijevega piruvata. Gojilno sredstvo je treba zamenjati 2- do 3-krat na teden.

Pogoji za rast:

Celične kulture CAL27 se hranijo pri 37 °C v vlažnem inkubatorju z 5 % dovodom CO2.

Shranjevanje:

Zamrznjene celice CAL27 se hranijo bodisi v plinski fazi tekočega dušika bodisi pri temperaturi pod -150 °C v zamrzovalniku z izjemno nizko temperaturo za daljše obdobje.

Postopek zamrzovanja in medij:

Za zamrzovanje celic CAL27 se priporoča zamrzovalno sredstvo CM-1 ali CM-ACF. Pri tem se priporoča počasen postopek zamrzovanja, ki omogoča le 1 °C padec temperature na minuto, da se ohrani sposobnost preživetja celic.

Postopek odmrzovanja:

Vialke z zamrznjenimi celicami se za 40–60 sekund postavijo v vodno kopel, nastavljeno na 37 °C, dokler ne ostane le majhen kepec ledu. Celicam se doda svež medij in se centrifugirajo. Nato se odstrani medij za zamrzovanje, celicam se doda svež rastni medij in se previdno ponovno suspendirajo. Celice se nato razporedijo v nove kolbe za rast.

Raven biološke varnosti:

Za ravnanje s celicami CAL27 in njihovo vzdrževanje so potrebne laboratorijske razmere ravni biološke varnosti 1.

 

Podrobnejši pogled na celice CAL27 pri 10-kratni in 20-kratni povečavi, ki poudarja njihovo zapleteno poligonalno strukturo.

Celična linija CAL27: prednosti in slabosti

CAL27 je široko uporabljena celična linija za ploskokletni karcinom ustne sluznice. V tem poglavju bomo poudarili nekatere pomembne prednosti in slabosti, povezane s temi rakavimi celicami.

Prednosti

Glavne prednosti celične linije CAL27 so:

Tumorigenost

Celična linija CAL27 ima tumorigeni potencial. Te celice lahko razvijejo tumorje, če se injicirajo v golo ali imunsko oslabljeno miško. To lahko raziskovalcem pomaga pri poglobljenem razumevanju biologije tumorja in mikrookolja.

Genetske mutacije

Celice CAL27 vsebujejo specifične genomne spremembe, kot je CAL27 P53, ki se pogosto pojavljajo pri ploskokletnem karcinomu ustne sluznice. Zato je uporaba CAL27 lahko koristna za raziskovalce, ki proučujejo vpliv teh mutacij na rast, razvoj in napredovanje raka.

Enostavna gojitev

Linija ploskokletnih celic iz ustne votline, CAL27, nima zahtevnih pogojev za gojenje celic. Zato jo je enostavno gojiti in vzdrževati v raziskovalnih laboratorijih.

 

Pomanjkljivosti

Pomanjkljivosti, povezane s celično linijo CAL27, so:

In vitro model

Celice CAL27 služijo kot in vitro model ploskokletnega karcinoma ustne sluznice. Vendar je pomembno opozoriti, da morda ne odražajo natančno značilnosti in kompleksnosti izvirnih ploskokletnih tumorjev.

 

Uporaba celic CAL27 v raziskavah

Celična linija CAL27 ima široko paleto uporab v biomedicinskih raziskavah. Nekatere pomembne raziskovalne uporabe so navedene tukaj.

• Biologija raka: Celice CAL27 se široko uporabljajo za raziskovanje molekularnih in celičnih mehanizmov, ki so osnova za razvoj in napredovanje ploskokletnega karcinoma ustne votline (OSCC). Raziskovalci proučujejo tudi genetske mutacije, signalne poti in pomembne biomarkerje, povezane s ploskokletnimi tumorji. V študiji, izvedeni leta 2021, so uporabili celice CAL27 in preučili vlogo CD147 pri razvoju ploskokletnega raka ustne votline. Rezultati študije so pokazali, da je izklop CD147 povzročil zaviranje proliferacije, migracije in invazije celic CAL27. Poleg tega njegova regulacija navzdol ovira tudi razvoj odpornosti na zdravila v rakavih celicah [2].
• Razvoj zdravil: Celicna linija CAL27 služi kot dragoceno orodje za presejanje in testiranje protitumorskih zdravil. Raziskovalci te celice uporabljajo za testiranje učinkovitosti različnih kemoterapevtskih sredstev, ciljnih terapij in eksperimentalnih zdravil pri zaviranju proliferacije, rasti in preživetja rakavih celic v ustih. Poleg tega je bil ocenjen tudi modulirajoči učinek potencialnih protirakavih sredstev na motene signalne poti rakavih celic. To lahko pomaga pri razvoju učinkovitih in personaliziranih zdravljenj za boj proti bolezni. V eni od študij so raziskovali protitumorski potencial nanodelcev cinkovega oksida z uporabo celic CAL27. Rezultati študije so pokazali, da so nanodelci cinkovega oksida imeli citotoksične učinke in so v celicah raka jezika CAL27 sprožili mitofagijo, posredovano prek poti PINK1/Parkin [3]. Podobno so raziskovalci opazili protirakavni potencial doksorubicina in njegove nanoformulirane oblike (Doxil) na raku ploskih celic ustne sluznice CAL27 [4].

5. Objave o celični liniji CAL27

V tem delu članka bomo predstavili nekaj zanimivih in najpogosteje citiranih publikacij o rakavih celicah CAL27:

Zaviranje celic ploskokletnega karcinoma ustne sluznice CAL27 z usmerjanjem na hedgehogov pot z vismodegibom ali itrakonazolom

Ta raziskava je bila objavljena v reviji Frontiers in Oncology (2020). Študija je raziskovala učinke vismodegiba ali itrakonazola proti raku ustne sluznice s pomočjo celic CAL27.  

PLAU spodbuja celično proliferacijo in epitelno-mezenhimalno prehod v skvamoznem karcinomu glave in vratu

Ta članek v reviji Frontiers in Genetics (2021) predlaga, da aktivator plazminogena, protein urokinaza (PLAU), spodbuja proliferacijo, migracijo in epitelno-mezenhimalno prehod (EMT) celic CAL27.

MikroRNA-145-5p poslabša celično apoptozo in oksidativni stres pri skvamoznem karcinomu jezika

Ta članek v reviji Experimental and Therapeutic Medicine (2021) je ugotovil, da miRNA-145-5p poslabša oksidativni stres in smrt celic CAL27 ter zavira signalno pot PI3K/AKT.

Protitumorska aktivnost rastlinskega izvlečka morina v celicah skvamoznega karcinoma jezika

Ta študija v reviji Oncology Reports (2018) je raziskala protirakovo aktivnost bioflavonoida imenovanega morin, pri čemer je uporabila celice CAL27.

Zmanjšanje ustnih patogenov in oksidativne poškodbe v celični liniji CAL 27 z izvlečki Rosmarinus officinalis L. in Taraxacum officinale Web.

Ta članek v reviji Journal of Ethnopharmacology (2023) je preučeval terapevtski potencial izvlečkov Rosmarinus officinalis L. in Taraxacum officinale na celicah CAL27.

Viri za celično linijo CAL27: protokoli, videi in več

Na voljo je omejeno število virov o celični liniji CAL27. V tem poglavju smo navedli nekaj splošnih protokolov, ki vam lahko pomagajo pri delu s celicami CAL27:

• Transfekcija celic CAL27: Ta video vam bo pomagal spoznati splošni protokol za transfekcijo plazmidne DNA.
• Subkultiviranje adhezivnih celic: Ta video vas bo izčrpno vodil skozi subkultiviranje adhezivnih celičnih linij.

Naslednja povezava vsebuje protokol za gojenje celic CAL27.

• Celična linija CAL27: Ta spletna stran vsebuje informacije o medijih CAL27, gostoti sejanja, času podvojitve itd. Poleg tega vsebuje protokol za subkultiviranje in ravnanje s proliferativnimi in krioprezerviranimi kulturami.

Sklici

1. Liu, X., et al., LINC00472 zavira rast ploskokletnega karcinoma ustne votline z delovanjem na os miR-455-3p/ELF3. Bioengineered, 2022. 13(1): str. 1162–1173.
2. Pan, S., et al., Knockout CD147 zavira proliferacijo, invazijo in odpornost na zdravila človeških celic raka ustne votline CAL27 in vitro in in vivo. International Journal of Biological Macromolecules, 2021. 181: str. 378–389.
3. Wang, J., et al., Nanodelci cinkovega oksida povzročajo toksičnost v celičnih linijah raka ustne votline CAL 27 z aktiviranjem mitofagije, posredovane s PINK1/Parkinom. International Journal of Nanomedicine, 2018: str. 3441–3450.
4. Abd El-Hamid, E.S., A.M. Gamal-Eldeen in A.M.S. Eldeen, Liposomsko obložen nano doksorubicin inducira apoptozo na celicah CAL-27 ploskokletnega karcinoma ustne votline. Arhiv ustne biologije, 2019. 103: str. 47–54.