CAL27 šūnas – padziļināta izpratne par galvas un kakla vēzi, izmantojot CAL27 šūnas

CAL27 ir viena no visbiežāk izmantotajām mutvārdu plakanšūnu karcinomas šūnu līnijām biomedicīniskajos pētījumos. Tā ir vērtīgs instruments plakanšūnu vēža sarežģītības izpētei, tostarp audzēja augšanai, attīstībai un pamatā esošajiem šūnu un molekulārajiem mehānismiem. Turklāt tā atvieglo zāļu skrīningu un testēšanu pretvēža zāļu izstrādei.

CAL27 šūnu izcelsme un vispārējās īpašības

Pirmā lieta, kas jums jāzina par šūnu līniju, ir tās izcelsme un vispārējās īpašības, kas to atšķir no citām šūnu līnijām. Šajā raksta sadaļā ir apkopota pamatinformācija par CAL27 šūnām. Jūs uzzināsiet: Kas ir CAL27 šūnu modelis? Kas ir CAL27 HPV? Kāds ir CAL27 HER2 statuss? Kāda ir CAL27 šūnu līnijas izcelsme? Kāda ir CAL27 šūnu morfoloģija? Kāds ir CAL27 šūnu izmērs?

• Mutes plakanšūnu vēža šūnu līnija CAL27 tika izveidota no 56 gadus veca baltā vīrieša mēles audiem, kuram tika diagnosticēts mēles plakanšūnu karcinoms. Šūnu līniju 1982. gadā izveidoja Gioanni un viņa kolēģi [1].
• CAL27 vēža šūnas uzrāda epitēlija tipa morfoloģiju.
• Šīm šūnām ir aneuploīds kariotips. To modālais hromosomu skaits ir 43.

Mikroskopā novērots plakanšūnu epitēlija šūnu slānis.

Informācija par CAL27 šūnu līnijas kultivēšanu

Lai šūnu līniju uzturētu viegli un praktiski, jums jāzina tās galvenās šūnu kultivēšanas prasības. Šajā sadaļā ir aprakstīti svarīgi šūnu kultivēšanas jēdzieni par CAL27 šūnu līniju. Jums jāzina: kāds ir šūnu līnijas CAL27 dubultošanās laiks? Kas ir CAL27 šūnu barotne? Kāds ir CAL27 šūnu līnijas subkultivēšanas koeficients? Kādi ir CAL27 kultivēšanas apstākļi? Kā kultivēt CAL27 šūnas?

Galvenie punkti CAL27 šūnu kultivēšanai

Dubultošanās laiks:

CAL27 šūnas izrāda vidēju augšanas ātrumu, un to populācijas dubultošanās laiks ir aptuveni 45 stundas.

Pielipušas vai suspensijā:

Šīs daudzstūra formas CAL27 šūnas adheziējas pie kultivēšanas trauka virsmas un aug monoslāņos.

Dalīšanas attiecība:

CAL27 šūnas tiek subkultivētas ar sadalīšanas attiecību no 1:2 līdz 1:4. Subkultivēšanai adhezīvās šūnas mazgā ar magnija un kalcija nesaturošu fosfāta buferšķīdumu (1x). Pēc tam šūnas inkubē ar Accutase (pārsēšanas šķīdumu) istabas temperatūrā 8–10 minūtes. Atdalītās šūnas pievieno svaigai barotnei un centrifugē. Savākto nogulsni pēc tam uzmanīgi atkārtoti suspendē un ielej jaunās kolbās, kas satur augšanas barotni.

Augšanas barotne:

CAL27 šūnu līnijas kultivēšanai izmanto DMEM barotni, kam pievienots 10 % FBS, 4,5 g/l glikozes, 4 mM L-glutamīna, 1,5 g/l NaHCO3 un 1,0 mM nātrija piruvāta. Barotni jāmaina 2–3 reizes nedēļā.

Augšanas apstākļi:

CAL27 šūnu kultūras tiek turētas 37 °C temperatūrā mitrinātā inkubatorā ar 5 % CO2 pievadi.

Uzglabāšana:

Sasaldētas CAL27 šūnas tiek uzglabātas vai nu šķidrā slāpekļa tvaika fāzē, vai ilgākā laika posmā ultra-zemas temperatūras saldētavā temperatūrā zem -150 °C.

Sasaldēšanas process un barotne:

CAL27 šūnu sasaldēšanai ieteicams izmantot CM-1 vai CM-ACF sasaldēšanas vidi. Šim nolūkam ieteicams lēns sasaldēšanas process, kas ļauj temperatūrai pazemināties tikai par 1 °C minūtē, lai saglabātu šūnu dzīvotspēju.

Atkausēšanas process:

Sasaldēto šūnu flakoni tiek ievietoti ūdens vannā, kas iepriekš iestatīta uz 37 °C, uz 40–60 sekundēm, līdz paliek neliels ledus gabaliņš. Šūnām pievieno svaigu barotni un centrifugē. Pēc tam sasaldēšanas barotne tiek noņemta, un šūnu nogulsnēm pievieno svaigu augšanas barotni un uzmanīgi atkārtoti suspendē. Tad šūnas tiek pārvietotas uz jaunām kolbām augšanai.

Bioloģiskās drošības līmenis:

CAL27 šūnu kultūras apstrādei un uzturēšanai ir nepieciešama 1. bioloģiskās drošības līmeņa laboratorija.

 

CAL27 šūnu detalizēts apskats ar 10x un 20x palielinājumu, kas parāda to sarežģīto daudzstūra struktūru.

CAL27 šūnu līnija: priekšrocības un trūkumi

CAL27 ir plaši izmantota mutvārdu plakanšūnu karcinomas šūnu līnija. Šajā sadaļā tiks izcelti daži nozīmīgi priekšrocības un trūkumi, kas saistīti ar šīm vēža šūnām.

Priekšrocības

CAL27 šūnu līnijas galvenās priekšrocības ir šādas:

Tumorigenitāte

CAL27 šūnu līnijai piemīt tumorigenitātes potenciāls. Šīs šūnas var izraisīt audzēju veidošanos, ja tās injicē kailām vai imūndeficītām pelēm. Tas var palīdzēt pētniekiem padziļināti izprast audzēju bioloģiju un mikroapstākļus.

Ģenētiskās mutācijas

CAL27 šūnās ir specifiskas genomiskas izmaiņas, piemēram, CAL27 P53, kas bieži sastopamas mutes plakanšūnu karcinomā. Tādējādi CAL27 izmantošana var būt izdevīga pētniekiem, kuri pēta šo mutāciju ietekmi uz vēža augšanu, attīstību un progresēšanu.

Viegli kultivējama

Mutes plakanšūnu līnijai CAL27 nav sarežģītu šūnu kultivēšanas prasību. Tādējādi to ir viegli kultivēt un uzturēt pētniecības laboratorijās.

 

Trūkumi

Ar CAL27 šūnu līniju saistītie trūkumi ir šādi:

In vitro modelis

CAL27 šūnas kalpo kā in vitro modelis mutvārdu plakanšūnu karcinomai. Tomēr ir svarīgi atzīmēt, ka tās var neatspoguļot precīzi sākotnējo plakanšūnu audzēju īpašības un sarežģītību.

 

CAL27 šūnu pielietojums pētniecībā

CAL27 šūnu līnijai ir plašs pielietojums biomedicīniskajos pētījumos. Daži no svarīgākajiem pētījumu pielietojumiem ir uzskaitīti šeit.

• Vēža bioloģija: CAL27 šūnas ir plaši izmantotas, lai pētītu molekulāros un šūnu mehānismus, kas ir pamatā mutveida šūnu karcinomas (OSCC) attīstībai un progresēšanai. Pētnieki pēta arī ģenētiskās mutācijas, signālu pārraides ceļus un svarīgus biomarķierus, kas saistīti ar mutveida šūnu audzējiem. 2021. gadā veiktajā pētījumā tika izmantotas CAL27 šūnas un pētīta CD147 loma mutveida šūnu vēža attīstībā mutē. Pētījuma rezultāti parādīja, ka CD147 nomākšana izraisīja CAL27 šūnu proliferācijas, migrācijas un invāzijas inhibīciju. Turklāt tā ekspresijas samazināšana kavē arī zāļu rezistences attīstību vēža šūnās [2].
• Zāļu attīstība: CAL27 šūnu līnija kalpo kā vērtīgs instruments pretvēža zāļu skrīningam un testēšanai. Pētnieki izmanto šīs šūnas, lai pārbaudītu dažādu ķīmijterapijas līdzekļu, mērķtiecīgu terapiju un eksperimentālo zāļu efektivitāti mutvārdu vēža šūnu proliferācijas, augšanas un dzīvotspējas inhibēšanā. Turklāt potenciālo pretvēža līdzekļu modulējošā ietekme ir novērtēta arī uz regulācijas traucējumiem pakļautajiem vēža šūnu signālceļiem. Tas var palīdzēt izstrādāt efektīvas un personalizētas ārstēšanas metodes cīņai pret slimību. Pētījumā tika izpētīts cinka oksīda nanodaļiņu pretvēža potenciāls, izmantojot CAL27 šūnas. Pētījuma rezultāti atklāja, ka cinka oksīda nanodaļiņas radīja citotoksisku iedarbību un izraisīja arī PINK1/Parkin ceļa mediētu mitofāgiju CAL27 mēles vēža šūnās [3]. Līdzīgi pētnieki novēroja doksorubicīna un tā nanoformulācijas (Doxil) pretvēža potenciālu attiecībā uz CAL27 mutvārdu plakanšūnu vēzi [4].

5. Publikācijas par CAL27 šūnu līniju

Šajā raksta sadaļā tiks apskatītas dažas interesantas un visbiežāk citētas publikācijas par CAL27 vēža šūnām:

CAL27 mutes plakanšūnu karcinomas šūnu inhibīcija, iedarbojoties uz hedgehog ceļu ar vismodegibu vai itrakonazolu

Šis pētījums tika publicēts žurnālā Frontiers in Oncology (2020). Pētījumā tika izpētīta vismodegiba vai itrakonazola ietekme uz mutvārdu plakanšūnu vēzi, izmantojot CAL27 šūnas.  

PLAU veicina šūnu proliferāciju un epitēlija-mezodermālo pāreju galvas un kakla plakanšūnu karcinomā

Šajā rakstā žurnālā Frontiers in Genetics (2021) tika izvirzīta hipotēze, ka plazminogēna aktivators, urokināzes (PLAU) proteīns, veicina CAL27 šūnu proliferāciju, migrāciju un epitēlija-mezodermālo pāreju (EMT).

MikroRNA-145-5p pastiprina šūnu apoptozi un oksidatīvo stresu mēles plakanšūnu karcinomā

Šajā rakstā žurnālā „Experimental and Therapeutic Medicine” (2021) atklāts, ka miRNA-145-5p pastiprina CAL27 šūnu oksidatīvo stresu un nāvi, kā arī nomāc PI3K/AKT signālceļu.

Augu ekstrakta morīna pretvēža aktivitāte mēles plakanšūnu karcinomas šūnās

Šajā pētījumā, kas publicēts žurnālā „Oncology Reports” (2018), izmantojot CAL27 šūnas, tika pētīta bioflavonoīda morīna pretvēža aktivitāte.

Mutes patogēnu un oksidatīvo bojājumu samazināšana CAL 27 šūnu līnijā, izmantojot Rosmarinus officinalis L. un Taraxacum officinale Web. ekstraktus

Šajā rakstā, kas publicēts žurnālā „Journal of Ethnopharmacology” (2023), tika pētīts Rosmarinus officinalis L. un Taraxacum officinale ekstraktu terapeitiskais potenciāls attiecībā uz CAL27 šūnām.

Resursi par CAL27 šūnu līniju: protokoli, video un citi

Par CAL27 šūnu līniju ir pieejami ierobežoti resursi. Šajā sadaļā esam uzskaitījuši dažus vispārīgus protokolus, kas var palīdzēt jums strādāt ar CAL27 šūnām:

• CAL27 šūnu transfekcija: Šis video palīdzēs jums apgūt vispārīgu protokolu plazmīdu DNS transfekcijai.
• Adhezīvo šūnu subkultivēšana: Šis video sniegs visaptverošu ceļvedi par adhezīvo šūnu līniju subkultivēšanu.

Šajā saitē ir atrodams CAL27 šūnu kultūras protokols.

• CAL27 šūnu līnija: Šajā tīmekļa vietnē ir informācija par CAL27 barotnēm, sēšanas blīvumu, dubultošanās laiku utt. Turklāt tajā ir protokols par subkultivēšanu un proliferējošu un kriokonservētu kultūru apstrādi.

Atsauces

1. Liu, X., et al., LINC00472 nomāc mutvārdu plakanšūnu karcinomas augšanu, iedarbojoties uz miR-455-3p/ELF3 asi. Bioengineered, 2022. 13(1): 1162.–1173. lpp.
2. Pan, S., et al., CD147 izslēgšana inhibē cilvēka mutvārdu vēža CAL27 šūnu proliferāciju, invāziju un rezistenci pret zālēm in vitro un in vivo. International Journal of Biological Macromolecules, 2021. 181: 378.–389. lpp.
3. Wang, J., et al., Cinka oksīda nanodaļiņas izraisa toksicitāti CAL 27 mutvārdu vēža šūnu līnijās, aktivizējot PINK1/Parkin-mediētu mitofāgiju. International Journal of Nanomedicine, 2018: 3441.–3450. lpp.
4. Abd El-Hamid, E.S., A.M. Gamal-Eldeen un A.M.S. Eldeen, Liposomu pārklāts nano doksorubicīns izraisa apoptozi mutvārdu plakanšūnu karcinomas CAL-27 šūnās. Archives of oral biology, 2019. 103: 47.–54. lpp.