Клітини CAL27 — детальний аналіз раку голови та шиї з використанням клітин CAL27

CAL27 — одна з найчастіше використовуваних клітинних ліній плоскоклітинного раку ротової порожнини в біомедичних дослідженнях. Це цінний інструмент для вивчення тонкощів плоскоклітинних раків, включаючи ріст пухлини, розвиток та основні клітинні й молекулярні механізми. Крім того, вона також полегшує скринінг та тестування ліків для розробки протиракових препаратів.

Походження та загальні характеристики клітин CAL27

Перше, що потрібно знати про клітинну лінію, — це її походження та загальні характеристики, які відрізняють її від інших клітинних ліній. Цей розділ статті містить основну інформацію про клітини CAL27. Ви дізнаєтеся: Що таке клітинна модель CAL27? Що таке CAL27 HPV? Який статус CAL27 HER2? Яке походження клітинної лінії CAL27? Яка морфологія клітин CAL27? Який розмір клітин CAL27?

• Клітинна лінія плоскоклітинного раку ротової порожнини CAL27 була створена з тканини язика 56-річного чоловіка європейської раси, у якого було діагностовано плоскоклітинний рак язика. Клітинна лінія була створена в 1982 році Джоанні та його колегами [1].
• Ракові клітини CAL27 мають епітеліоподібну морфологію.
• Ці клітини мають анеуплоїдний каріотип. Модальна кількість хромосом у них становить 43.

Масив плоскоклітинного епітелію, спостережуваний під мікроскопом.

Інформація щодо культивування клітинної лінії CAL27

Для простого та ефективного утримання клітинної лінії необхідно знати основні вимоги до культивування клітин. У цьому розділі розглядаються важливі поняття щодо культивування клітинної лінії CAL27. Вам слід знати: Який час подвоєння клітинної лінії CAL27? Що таке середовище для клітин CAL27? Який коефіцієнт субкультури клітинної лінії CAL27? Які умови культивування CAL27? Як культивувати клітини CAL27?

Ключові моменти культивування клітин CAL27

Час подвоєння:

Клітини CAL27 демонструють помірну швидкість росту з часом подвоєння популяції приблизно 45 годин.

Адгезивні або у суспензії:

Ці багатокутні клітини CAL27 прилипають до поверхні культуральної посудини та ростуть у моношари.

Коефіцієнт поділу:

Клітини CAL27 субкультурують із коефіцієнтом поділу від 1:2 до 1:4. Для субкультурування адгезивні клітини промивають фосфатно-сольовим буфером без магнію та кальцію (1x). Після цього клітини інкубують з Accutase (розчином для пасажування) при кімнатній температурі протягом 8–10 хвилин. Відокремлені клітини додають до свіжого середовища та центрифугують. Зібраний осад потім обережно ресуспендують і переливають у нові колби, що містять середовище для росту.

Середовище для росту:

Для культивування клітинної лінії CAL27 використовують середовище DMEM, доповнене 10% FBS, 4,5 г/л глюкози, 4 мМ L-глутаміну, 1,5 г/л NaHCO3 та 1,0 мМ пірувату натрію. Середовище слід замінювати 2–3 рази на тиждень.

Умови культивування:

Культури клітин CAL27 утримують при температурі 37 °C у зволоженому інкубаторі з подачею 5% CO2.

Зберігання:

Заморожені клітини CAL27 зберігаються або у паровій фазі рідкого азоту, або при температурі нижче -150 °C в ультранизькотемпературному морозильнику протягом тривалого часу.

Процес заморожування та середовище:

Для заморожування клітин CAL27 рекомендується використовувати заморожувальне середовище CM-1 або CM-ACF. Для цього рекомендується повільний процес заморожування, що забезпечує зниження температури лише на 1 °C за хвилину, щоб зберегти життєздатність клітин.

Процес розморожування:

Пробірки із замороженими клітинами поміщають у водяну баню, попередньо налаштовану на температуру 37 °C, на 40–60 секунд, доки не залишиться невеликий шматок льоду. До клітин додають свіже середовище та центрифугують. Після цього середовище для заморожування видаляють, а осад клітин додають до свіжого середовища для росту та обережно ресуспендують. Потім клітини розливають у нові колби для росту.

Рівень біобезпеки:

Для роботи з культурою клітин CAL27 та її утримання необхідні лабораторні умови рівня біобезпеки 1.

 

Детальний огляд клітин CAL27 при 10-кратному та 20-кратному збільшенні, що дозволяє побачити їхню складну полігональну структуру.

Клітинна лінія CAL27: переваги та недоліки

CAL27 — це широко використовувана клітинна лінія плоскоклітинного раку ротової порожнини. У цьому розділі розглядаються деякі суттєві переваги та недоліки, пов’язані з цими раковими клітинами.

Переваги

Основними перевагами клітинної лінії CAL27 є:

Онкогенність

Клітинна лінія CAL27 має пухлиногенний потенціал. Ці клітини можуть утворювати пухлини при введенні в організм голих або імунокомпрометованих мишей. Це може допомогти дослідникам глибше зрозуміти біологію пухлин та їх мікросередовище.

Генетичні мутації

Клітини CAL27 містять специфічні геномні зміни, такі як CAL27 P53, що часто зустрічаються при плоскоклітинному раку ротової порожнини. Таким чином, використання CAL27 може бути корисним для дослідників, які вивчають вплив цих мутацій на ріст, розвиток та прогресування раку.

Легкість культивування

Лінія плоскоклітинного раку ротової порожнини CAL27 не має вибагливих вимог до культивування клітин. Таким чином, її легко культивувати та підтримувати в дослідницьких лабораторіях.

 

Недоліки

Недоліки, пов'язані з клітинною лінією CAL27, такі:

Модель in vitro

Клітини CAL27 слугують in vitro моделлю плоскоклітинного раку ротової порожнини. Однак важливо зазначити, що вони можуть неточно відображати характеристики та складність оригінальних плоскоклітинних пухлин.

 

Застосування клітин CAL27 у дослідженнях

Клітинна лінія CAL27 має широкий спектр застосування в біомедичних дослідженнях. Деякі з важливих напрямків досліджень наведені нижче.

• Біологія раку: Клітини CAL27 широко використовуються для дослідження молекулярних та клітинних механізмів, що лежать в основі розвитку та прогресування плоскоклітинного раку ротової порожнини (OSCC). Дослідники також вивчають генетичні мутації, сигнальні шляхи та важливі біомаркери, пов'язані з плоскоклітинними пухлинами. У дослідженні, проведеному в 2021 році, використовувалися клітини CAL27 для вивчення ролі CD147 у розвитку плоскоклітинного раку ротової порожнини. Результати дослідження показали, що пригнічення експресії CD147 призводило до інгібування проліферації, міграції та інвазії клітин CAL27. Крім того, зниження рівня експресії цього білка також перешкоджає розвитку резистентності до ліків у ракових клітинах [2].
• Розробка ліків: Клітинна лінія CAL27 слугує цінним інструментом для скринінгу та тестування протипухлинних препаратів. Дослідники використовують ці клітини для перевірки ефективності різних хіміотерапевтичних засобів, цільових терапій та експериментальних препаратів у пригніченні проліферації, росту та життєздатності клітин раку ротової порожнини. Крім того, модулюючий ефект потенційних протиракових агентів також оцінювався на порушених сигнальних шляхах ракових клітин. Це може допомогти у розробці ефективних та персоналізованих методів лікування для боротьби з хворобою. У одному дослідженні вивчався протипухлинний потенціал наночастинок оксиду цинку з використанням клітин CAL27. Результати дослідження показали, що наночастинки оксиду цинку чинили цитотоксичну дію, а також індукували мітофагію, опосередковану сигнальним шляхом PINK1/Parkin, у клітинах раку язика CAL27 [3]. Аналогічно, дослідники спостерігали протираковий потенціал доксорубіцину та його наноформульованої форми (Doxil) на плоскоклітинному раку ротової порожнини CAL27 [4].

5. Публікації, присвячені клітинній лінії CAL27

У цьому розділі статті розглядаються кілька цікавих і найбільш цитованих публікацій про ракові клітини CAL27:

Інгібування клітин плоскоклітинного раку ротової порожнини CAL27 шляхом впливу на шлях Hedgehog за допомогою вісмодегібу або ітраконазолу

Це дослідження було опубліковано в журналі Frontiers in Oncology (2020). У дослідженні вивчався протираковий ефект вісмодегібу або ітраконазолу на плоскоклітинний рак ротової порожнини з використанням клітин CAL27.  

PLAU сприяє проліферації клітин та епітеліально-мезенхімальному переходу при плоскоклітинному раку голови та шиї

У цій статті, опублікованій у журналі Frontiers in Genetics (2021), висловлено припущення, що активатор плазміногену, білок урокінази (PLAU), сприяє проліферації, міграції та епітеліально-мезенхімальному переходу (EMT) клітин CAL27.

МікроРНК-145-5p посилює апоптоз клітин та окислювальний стрес при плоскоклітинному раку язика

У цій статті, опублікованій у журналі Experimental and Therapeutic Medicine (2021), було виявлено, що miRNA-145-5p посилює окислювальний стрес та загибель клітин CAL27 і пригнічує сигнальний шлях PI3K/AKT.

Протипухлинна активність рослинного екстракту морину в клітинах плоскоклітинного раку язика

У цьому дослідженні, опублікованому в журналі «Oncology Reports» (2018), було досліджено протиракову активність біофлавоноїду під назвою морин з використанням клітин CAL27.

Зменшення кількості патогенів ротової порожнини та окислювального пошкодження в клітинній лінії CAL 27 за допомогою екстрактів Rosmarinus officinalis L. та Taraxacum officinale Web.

У цій статті, опублікованій у журналі Journal of Ethnopharmacology (2023), досліджувався терапевтичний потенціал екстрактів Rosmarinus officinalis L. та Taraxacum officinale на клітинах CAL27.

Ресурси для клітинної лінії CAL27: протоколи, відео та інше

Доступних ресурсів щодо клітинної лінії CAL27 небагато. У цьому розділі ми перелічили деякі загальні протоколи, які також можуть допомогти вам у роботі з клітинами CAL27:

• Трансфекція клітин CAL27: це відео допоможе вам ознайомитися із загальним протоколом трансфекції плазмідної ДНК.
• Субкультурування адгезивних клітин: це відео надасть вам вичерпні вказівки щодо субкультурування адгезивних клітинних ліній.

За посиланням нижче наведено протокол культивування клітин CAL27.

• Клітинна лінія CAL27: Цей веб-сайт містить інформацію про середовища для CAL27, щільність висівання, час подвоєння тощо. Крім того, він містить протокол субкультури та роботи з проліферуючими та кріоконсервованими культурами.

Посилання

1. Liu, X., et al., LINC00472 пригнічує ріст плоскоклітинного раку ротової порожнини, впливаючи на вісь miR-455-3p/ELF3. Bioengineered, 2022. 13(1): с. 1162-1173.
2. Pan, S., et al., Нокаут CD147 інгібує проліферацію, інвазію та резистентність до ліків клітин раку ротової порожнини людини CAL27 in vitro та in vivo. International Journal of Biological Macromolecules, 2021. 181: с. 378–389.
3. Wang, J., et al., Наночастинки оксиду цинку індукують токсичність у клітинних лініях раку ротової порожнини CAL 27 шляхом активації мітофагії, опосередкованої PINK1/Parkin. International Journal of Nanomedicine, 2018: с. 3441–3450.
4. Абд Ель-Хамід, Е.С., А.М. Гамаль-Ельдін та А.М.С. Ельдін, Нанодоксрубіцин, покритий ліпосомами, індукує апоптоз у клітинах плоскоклітинного раку ротової порожнини CAL-27. Архів оральної біології, 2019. 103: с. 47–54.