CAL27-celler – målrettet innsikt i hode- og nakkekreft ved hjelp av CAL27-celler

CAL27 er en av de mest brukte cellelinjene for plateepitelkarsinom i munnhulen i biomedisinsk forskning. Den er et verdifullt verktøy for å studere kompleksiteten ved plateepitelkreft, inkludert tumorvekst, utvikling og underliggende cellulære og molekylære mekanismer. Dessuten letter den også legemiddelscreening og testing for utvikling av kreftmedisiner.

Opprinnelse og generelle egenskaper ved CAL27-celler

Det første du trenger å vite om en cellelinje er dens opprinnelse og generelle egenskaper som skiller den fra andre cellelinjer. Denne delen av artikkelen inneholder grunnleggende informasjon om CAL27-celler. Du vil lære: Hva er CAL27-cellemodellen? Hva er CAL27 HPV? Hva er CAL27 HER2-status? Hva er opprinnelsen til CAL27-cellelinjen? Hva er morfologien til CAL27-celler? Hva er størrelsen på CAL27-celler?

• Den orale plateepitelkreftcellelinjen, CAL27, ble utviklet fra tungevevet til en 56 år gammel hvit mann som hadde plateepitelkarsinom i tungen. Cellelinjen ble etablert i 1982 av Gioanni og hans kolleger [1].
• CAL27-kreftcellene har en epitelignende morfologi.
• Disse cellene har en aneuploid karyotype. De har et modalt kromosomtall på 43.

En gruppe plateepitelceller sett under mikroskopet.

Informasjon om dyrking av CAL27-cellelinjen

For enkel og gjennomførbar vedlikehold av cellelinjen må du kjenne til de viktigste kravene til cellekultivering. Dette avsnittet dekker viktige begreper innen cellekultivering av CAL27-cellelinjen. Du bør vite: Hva er doblingstiden for cellelinjen CAL27? Hva er CAL27-cellemedium? Hva er subkultiveringsforholdet for CAL27-cellelinjen? Hva er dyrkingsbetingelsene for CAL27? Hvordan dyrker man CAL27-celler?

Viktige punkter for dyrking av CAL27-celler

Fordoblingstid:

CAL27-cellene har en moderat veksthastighet med en fordoblingstid på ca. 45 timer.

Adherent eller i suspensjon:

Disse polygonale CAL27-cellene fester seg til overflaten av dyrkningsbeholderen og vokser til monolag.

Delingsforhold:

CAL27-celler subkultiveres med et delingsforhold på 1:2 til 1:4. For subkultivering vaskes vedheftende celler med magnesium- og kalsiumfri fosfatbuffersaltvann (1x). Deretter inkuberes cellene med Accutase (passasjeløsning) ved romtemperatur i 8 til 10 minutter. Løsrevne celler tilsettes ferskt medium og sentrifugeres. Den oppsamlede pellet ble deretter forsiktig resuspendert og hellet i nye kolber som inneholdt vekstmedium.

Vekstmedium:

DMEM-medium tilsatt 10 % FBS, 4,5 g/L glukose, 4 mM L-glutamin, 1,5 g/L NaHCO3 og 1,0 mM natriumpyruvat brukes til å dyrke CAL27-cellelinjen. Mediet bør skiftes 2 til 3 ganger i uken.

Vekstbetingelser:

CAL27-cellekulturer oppbevares ved 37 °C i en fuktet inkubator med 5 % CO2-tilførsel.

Oppbevaring:

Frosne CAL27-celler oppbevares enten i dampfasen av flytende nitrogen eller ved temperaturer under -150 °C i en ultralav fryser i lengre perioder.

Fryseprosess og medium:

CM-1 eller CM-ACF frysemedium anbefales for frysing av CAL27-celler. For dette anbefales en langsom fryseprosess som tillater kun en temperaturnedgang på 1 °C per minutt for å beskytte cellenes levedyktighet.

Tineprosess:

Frosne celleampuller plasseres i et vannbad forhåndsinnstilt til 37 °C i 40–60 sekunder til det kun gjenstår en liten isklump. Cellene tilsettes ferskt medium og sentrifugeres. Deretter fjernes frysemediet, og cellepelleten tilsettes ferskt vekstmedium og resuspenderes forsiktig. Cellene fordeles deretter i nye kolber for vekst.

Biosikkerhetsnivå:

Laboratorieforhold på biosikkerhetsnivå 1 er nødvendig for håndtering og vedlikehold av CAL27-cellekulturer.

 

Et nærmere blikk på CAL27-celler ved 10x og 20x forstørrelse, som fremhever deres intrikate polygonale struktur.

CAL27-cellelinjen: Fordeler og ulemper

CAL27 er en mye brukt cellelinje for plateepitelkarsinom i munnhulen. I dette avsnittet vil vi belyse noen viktige fordeler og ulemper knyttet til disse kreftcellene.

Fordeler

De viktigste fordelene med CAL27-cellelinjen er:

Tumorigenisitet

CAL27-cellelinjen har tumorigenisk potensial. Disse cellene kan utvikle svulster når de injiseres i nakne eller immunsvekkede mus. Dette kan hjelpe forskere med å forstå svulstbiologi og mikromiljøet i dybden.

Genetiske mutasjoner

CAL27-celler har spesifikke genomiske forandringer, som CAL27 P53, som ofte forekommer i plateepitelkarsinom i munnhulen. Derfor kan det være en fordel å bruke CAL27 for forskere som studerer hvordan disse mutasjonene påvirker kreftens vekst, utvikling og progresjon.

Enkel å dyrke

Den orale plateepitelcellelinjen, CAL27, har ingen krevende krav til cellekultur. Det er derfor enkelt å dyrke og vedlikeholde den i forskningslaboratorier.

 

Ulemper

Ulempene ved CAL27-cellelinjen er:

In vitro-modell

CAL27-celler fungerer som en in vitro-modell for oralt plateepitelkarsinom. Det er imidlertid viktig å merke seg at de kanskje ikke gjenspeiler egenskapene og kompleksiteten til de opprinnelige plateepitelkarsinomene nøyaktig.

 

Anvendelser av CAL27-celler i forskning

CAL27-cellelinjen har et bredt spekter av anvendelser innen biomedisinsk forskning. Noen av de viktigste forskningsanvendelsene er oppført her.

• Kreftbiologi: CAL27-celler har blitt mye brukt til å utforske de molekylære og cellulære mekanismene som ligger til grunn for utviklingen og progresjonen av oralt plateepitelkarsinom (OSCC). Forskere studerer også genetiske mutasjoner, signalveier og viktige biomarkører relatert til plateepitelkreft. En studie gjennomført i 2021 benyttet CAL27-celler og undersøkte rollen til CD147 i utviklingen av plateepitelkarsinom i munnhulen. Resultatene av studien viste at nedregulering av CD147 førte til hemming av CAL27-cellers proliferasjon, migrasjon og invasjon. Dessuten hindrer nedreguleringen også utviklingen av medikamentresistens i kreftceller [2].
• Legemiddelutvikling: CAL27-cellelinjen fungerer som et verdifullt verktøy for screening og testing av antitumorlegemidler. Forskere bruker disse cellene til å teste effekten av ulike kjemoterapeutiske midler, målrettede terapier og eksperimentelle legemidler når det gjelder å hemme spredning, vekst og levedyktighet hos kreftceller i munnhulen. Videre har den modulerende effekten av de potensielle kreftmedisinene også blitt vurdert på de dysregulerte signalveiene i kreftcellene. Dette kan bidra til å utvikle effektive og personaliserte behandlinger for å bekjempe sykdommen. En studie undersøkte antitumorpotensialet til sinkoksid-nanopartikler ved bruk av CAL27-celler. Studiens funn avslørte at sinkoksid-nanopartikler produserte cytotoksiske effekter og også induserte PINK1/Parkin-banemediert mitofagi i CAL27-tungekreftceller [3]. På samme måte observerte forskere det kreftbekjempende potensialet til doxorubicin og dets nanoformulerte form (Doxil) på CAL27-kreft i munnhulen [4].

5. Publikasjoner om CAL27-cellelinjen

Denne delen av artikkelen vil omhandle noen interessante og mest siterte publikasjoner om CAL27-kreftceller:

Hemming av CAL27-celler fra oralt plateepitelkarsinom ved å målrette hedgehog-signalveien med vismodegib eller itrakonazol

Denne forskningen ble publisert i Frontiers in Oncology (2020). Studien undersøkte effekten av vismodegib eller itrakonazol mot oral plateepitelkreft ved bruk av CAL27-celler.  

PLAU fremmer celleproliferasjon og epitel-mesenkymal overgang i plateepitelkarsinom i hode og nakke

Denne artikkelen i Frontiers in Genetics (2021) foreslo at plasminogenaktivator, urokinase (PLAU)-proteinet, fremmer proliferasjon, migrasjon og epitel-mesenkymal overgang (EMT) av CAL27-celler.

MicroRNA-145-5p forverrer celleapoptose og oksidativt stress i plateepitelkarsinom i tungen

Denne artikkelen i Experimental and Therapeutic Medicine (2021) fant at miRNA-145-5p forverrer oksidativt stress og død i CAL27-celler og undertrykker PI3K/AKT-signalveien.

Antitumoraktivitet av planteekstraktet morin i plattcellekarsinomceller i tungen

Denne studien i Oncology Reports (2018) undersøkte den krefthemmende virkningen av et bioflavonoid kalt morin, ved bruk av CAL27-celler.

Reduksjon av orale patogener og oksidativ skade i CAL 27-cellelinjen ved hjelp av Rosmarinus officinalis L. og Taraxacum officinale Web. Ekstrakter

Denne artikkelen i Journal of Ethnopharmacology (2023) undersøkte det terapeutiske potensialet til Rosmarinus officinalis L. og Taraxacum officinale-ekstrakter på CAL27-celler.

Ressurser for CAL27-cellelinjen: Protokoller, videoer og mer

Det finnes begrensede tilgjengelige ressurser om CAL27-cellelinjen. I denne delen har vi listet opp noen generelle protokoller som også kan hjelpe deg med å håndtere CAL27-celler:

• CAL27-celletransfeksjon: Denne videoen vil hjelpe deg med å lære en generell protokoll for plasmid-DNA-transfeksjon.
• Subkultivering av adherente celler: Denne videoen gir deg en omfattende veiledning om subkultivering av adherente cellelinjer.

Følgende lenke inneholder protokollen for CAL27-cellekultur.

• CAL27-cellelinje: Dette nettstedet inneholder informasjon om CAL27-medier, utsåingstetthet, doblingstid osv. I tillegg inneholder det en protokoll for subkultivering og håndtering av prolifererende og kryokonserverte kulturer.

Referanser

1. Liu, X., et al., LINC00472 hemmer veksten av oralt plateepitelkarsinom ved å målrette seg mot miR-455-3p/ELF3-aksen. Bioengineered, 2022. 13(1): s. 1162–1173.
2. Pan, S., et al., Knockout av CD147 hemmer proliferasjon, invasjon og medikamentresistens hos humane orale kreftceller av typen CAL27 in vitro og in vivo. International Journal of Biological Macromolecules, 2021. 181: s. 378–389.
3. Wang, J., et al., Sinkoksid-nanopartikler induserer toksisitet i CAL 27-celleinnekulturer for munnhulekreft ved å aktivere PINK1/Parkin-mediert mitofagi. International Journal of Nanomedicine, 2018: s. 3441–3450.
4. Abd El-Hamid, E.S., A.M. Gamal-Eldeen og A.M.S. Eldeen, Liposom-belagt nano-doxorubicin induserer apoptose på CAL-27-celler fra oralt plateepitelkarsinom. Archives of oral biology, 2019. 103: s. 47–54.