Células CAL27 – Análises detalhadas sobre o câncer de cabeça e pescoço utilizando células CAL27

A CAL27 é uma das linhagens celulares de carcinoma espinocelular oral mais utilizadas na pesquisa biomédica. É uma ferramenta valiosa para o estudo das complexidades dos cânceres espinocelulares, incluindo o crescimento e o desenvolvimento tumoral, bem como os mecanismos celulares e moleculares subjacentes. Além disso, ela também facilita a triagem e o teste de medicamentos para o desenvolvimento de agentes anticâncer.

Origem e características gerais das células CAL27

A primeira coisa que você precisa saber sobre uma linhagem celular é sua origem e as características gerais que a distinguem de outras linhagens. Esta seção do artigo abrange informações básicas sobre as células CAL27. Você aprenderá: O que é o modelo celular CAL27? O que é o HPV CAL27? Qual é o status HER2 das células CAL27? Qual é a origem da linha celular CAL27? Qual é a morfologia das células CAL27? Qual é o tamanho das células CAL27?

• A linha celular de câncer de células escamosas orais, CAL27, foi desenvolvida a partir do tecido da língua de um homem branco de 56 anos que apresentava carcinoma de células escamosas da língua. A linha celular foi estabelecida em 1982 por Gioanni e seus colegas [1].
• As células cancerosas da CAL27 apresentam uma morfologia semelhante à epitelial.
• Essas células apresentam um cariótipo aneuploide. Elas possuem um número modal de cromossomos igual a 43.

Uma matriz de células epiteliais escamosas observada ao microscópio.

Informações sobre o cultivo da linha celular CAL27

Para uma manutenção fácil e viável da linha celular, é necessário conhecer seus principais requisitos de cultura celular. Esta seção aborda os conceitos importantes de cultura celular relativos à linha celular CAL27. Você deve saber: Qual é o tempo de duplicação da linha celular CAL27? Qual é o meio de cultura da CAL27? Qual é a taxa de subcultura da linha celular CAL27? Quais são as condições de cultura da CAL27? Como se cultiva as células CAL27?

Pontos-chave para a cultura de células CAL27

Tempo de duplicação:

As células CAL27 apresentam uma taxa de crescimento moderada, com um tempo de duplicação da população de aproximadamente 45 horas.

Adesivas ou em suspensão:

Essas células CAL27 poligonais aderem à superfície do recipiente de cultura e crescem formando monocamadas.

Proporção de divisão:

As células CAL27 são subcultivadas com uma proporção de divisão de 1:2 a 1:4. Para o subcultivo, as células aderentes são lavadas com solução salina tamponada com fosfato, livre de magnésio e cálcio (1x). Em seguida, as células são incubadas com Accutase (solução de passagem) à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos. As células desprendidas recebem meio fresco e são centrifugadas. O sedimento coletado é então cuidadosamente ressuspenso e transferido para novos frascos contendo meio de crescimento.

Meio de crescimento:

Para a cultura da linhagem celular CAL27, utiliza-se meio DMEM suplementado com 10% de FBS, 4,5 g/L de glicose, 4 mM de L-glutamina, 1,5 g/L de NaHCO₃ e 1,0 mM de piruvato de sódio. O meio deve ser trocado de 2 a 3 vezes por semana.

Condições de crescimento:

As culturas de células CAL27 são mantidas a 37 °C em uma incubadora umidificada com suprimento de 5% de CO₂.

Armazenamento:

As células CAL27 congeladas são mantidas na fase de vapor de nitrogênio líquido ou a temperaturas inferiores a -150 °C em um freezer de temperatura ultrabaixa por períodos mais longos.

Processo de congelamento e meio:

Recomenda-se o uso do meio de congelamento CM-1 ou CM-ACF para congelar as células CAL27. Para isso, recomenda-se um processo de congelamento lento, que permita apenas uma queda de 1 °C na temperatura por minuto, a fim de proteger a viabilidade das células.

Processo de descongelamento:

Os frascos com células congeladas são colocados em um banho-maria pré-ajustado a 37 °C por 40 a 60 segundos, até que reste apenas um pequeno pedaço de gelo. As células recebem meio fresco e são centrifugadas. Em seguida, o meio de congelamento é removido, e o sedimento celular recebe meio de crescimento fresco e é cuidadosamente ressuspenso. As células são então transferidas para novos frascos para crescimento.

Nível de biossegurança:

São necessárias instalações laboratoriais com nível de biossegurança 1 para o manuseio e a manutenção da cultura celular CAL27.

 

Imagens detalhadas das células CAL27 com ampliação de 10x e 20x, destacando sua complexa estrutura poligonal.

Linha celular CAL27: vantagens e desvantagens

A CAL27 é uma linha celular amplamente utilizada no estudo do carcinoma espinocelular oral. Esta seção destacará algumas vantagens e desvantagens significativas relacionadas a essas células cancerosas.

Vantagens

As principais vantagens da linha celular CAL27 são:

Tumorigenicidade

A linha celular CAL27 possui potencial tumorigênico. Essas células podem desenvolver tumores quando injetadas em camundongos nude ou imunocomprometidos. Isso pode ajudar os pesquisadores a compreender em profundidade a biologia do tumor e seu microambiente.

Mutações genéticas

As células CAL27 apresentam alterações genômicas específicas, como a mutação CAL27 P53, comumente observada no carcinoma espinocelular oral. Assim, o uso da CAL27 pode ser vantajoso para pesquisadores que estudam o impacto dessas mutações no crescimento, desenvolvimento e progressão do câncer.

Fácil de cultivar

A linha celular de células escamosas orais, CAL27, não apresenta requisitos exigentes de cultura celular. Portanto, é fácil de cultivar e manter em laboratórios de pesquisa.

 

Desvantagens

As desvantagens associadas à linhagem celular CAL27 são:

Modelo in vitro

As células CAL27 servem como modelo in vitro do carcinoma espinocelular oral. No entanto, é importante observar que elas podem não refletir com precisão as características e a complexidade dos tumores espinocelulares originais.

 

Aplicações das células CAL27 na pesquisa

A linha celular CAL27 possui uma ampla gama de aplicações na pesquisa biomédica. Alguns dos principais usos na pesquisa estão listados a seguir.

• Biologia do câncer: As células CAL27 têm sido amplamente utilizadas para explorar os mecanismos moleculares e celulares subjacentes ao desenvolvimento e à progressão do carcinoma espinocelular oral (OSCC). Os pesquisadores também estudam mutações genéticas, vias de sinalização e biomarcadores importantes relacionados aos tumores de células escamosas. Um estudo realizado em 2021 utilizou células CAL27 e investigou o papel do CD147 no desenvolvimento do câncer de células escamosas oral. Os resultados do estudo mostraram que a supressão do CD147 causou inibição da proliferação, migração e invasão das células CAL27. Além disso, sua regulação negativa também impede o desenvolvimento de resistência a medicamentos nas células cancerosas [2].
• Desenvolvimento de medicamentos: a linhagem celular CAL27 serve como uma ferramenta valiosa para a triagem e o teste de medicamentos antitumorais. Os pesquisadores utilizam essas células para testar a eficácia de vários agentes quimioterápicos, terapias direcionadas e medicamentos experimentais na inibição da proliferação, do crescimento e da viabilidade das células cancerosas orais. Além disso, o efeito modulador dos potenciais agentes anticâncer também foi avaliado nas vias de sinalização desreguladas das células cancerosas. Isso pode auxiliar no desenvolvimento de tratamentos eficazes e personalizados para combater a doença. Um estudo explorou o potencial antitumoral de nanopartículas de óxido de zinco utilizando células CAL27. Os resultados do estudo revelaram que as nanopartículas de óxido de zinco produziram efeitos citotóxicos e também induziram a mitofagia mediada pela via PINK1/Parkin em células CAL27 de câncer de língua [3]. Da mesma forma, pesquisadores observaram o potencial anticâncer da doxorrubicina e de sua forma nanoformulada (Doxil) no câncer de células escamosas da boca CAL27 [4].

5. Publicações sobre a linhagem celular CAL27

Esta seção do artigo abordará algumas publicações interessantes e mais citadas sobre as células cancerosas CAL27:

Inibição das células do carcinoma espinocelular oral CAL27 por meio da ação sobre a via Hedgehog com vismodegibe ou itraconazol

Esta pesquisa foi publicada na revista *Frontiers in Oncology* (2020). O estudo explorou os efeitos anticancerígenos do vismodegib ou do itraconazol no carcinoma espinocelular oral utilizando células CAL27.  

A PLAU promove a proliferação celular e a transição epitelial-mesenquimal no carcinoma espinocelular de cabeça e pescoço

Este artigo publicado na revista *Frontiers in Genetics* (2021) propôs que a proteína ativadora do plasminogênio, a uroquinase (PLAU), estimula a proliferação, a migração e a transição epitelial-mesenquimal (EMT) das células CAL27.

O microRNA-145-5p agrava a apoptose celular e o estresse oxidativo no carcinoma espinocelular da língua

Este artigo publicado na revista Experimental and Therapeutic Medicine (2021) constatou que o miRNA-145-5p agrava o estresse oxidativo e a morte das células CAL27 e suprime a via de sinalização PI3K/AKT.

Atividade antitumoral do extrato vegetal morina em células de carcinoma espinocelular da língua

Este estudo publicado na revista Oncology Reports (2018) explorou a atividade anticâncer de um bioflavonóide chamado morina, utilizando células CAL27.

Redução de patógenos orais e danos oxidativos na linhagem celular CAL 27 por meio de extratos de Rosmarinus officinalis L. e Taraxacum officinale Web.

Este artigo publicado no Journal of Ethnopharmacology (2023) investigou o potencial terapêutico dos extratos de Rosmarinus officinalis L. e Taraxacum officinale nas células CAL27.

Recursos para a linha celular CAL27: protocolos, vídeos e muito mais

Os recursos disponíveis sobre a linha celular CAL27 são limitados. Nesta seção, listamos alguns protocolos gerais que também podem ajudá-lo a trabalhar com células CAL27:

• Transfecção de células CAL27: Este vídeo ajudará você a aprender um protocolo geral para a transfecção de DNA plasmídico.
• Subcultura de células aderentes: este vídeo irá orientá-lo de forma abrangente sobre a subcultura de linhagens celulares aderentes.

O link a seguir contém o protocolo de cultura de células CAL27.

• Linha celular CAL27: Este site contém informações sobre meios de cultura para CAL27, densidade de semeadura, tempo de duplicação etc. Além disso, contém um protocolo para subcultura e manuseio de culturas proliferativas e criopreservadas.

Referências

1. Liu, X., et al., LINC00472 suprime o crescimento do carcinoma espinocelular oral ao atuar no eixo miR-455-3p/ELF3. Bioengineered, 2022. 13(1): p. 1162-1173.
2. Pan, S., et al., A inativação do CD147 inibe a proliferação, a invasão e a resistência a medicamentos das células CAL27 de câncer bucal humano in vitro e in vivo. International Journal of Biological Macromolecules, 2021. 181: p. 378-389.
3. Wang, J., et al., Nanopartículas de óxido de zinco induzem toxicidade em linhagens celulares CAL 27 de câncer bucal por meio da ativação da mitofagia mediada por PINK1/Parkin. International Journal of Nanomedicine, 2018: p. 3441-3450.
4. Abd El-Hamid, E.S., A.M. Gamal-Eldeen e A.M.S. Eldeen, A nano-doxorrubicina revestida por lipossomas induz a apoptose em células CAL-27 de carcinoma espinocelular oral. Archives of Oral Biology, 2019. 103: p. 47-54.